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Techniques and Methods 技术与方法
生物化学与生物物理进展
Progress in Biochemistry and Biophysics
2011, 38(12): 1171~1177
改良2, 4-二硝基苯肼法测定脑内源甲醛*
1, 2) 1) 1)**
苏 涛 魏 艳 赫荣乔
1) 2)
( 中国科学院生物物理研究所，脑与认知科学国家重点实验室，北京100101； 中国科学院研究生院，北京100049)
摘要 内源甲醛代谢失衡所造成的脑慢性损伤被认为是衰老过程中记忆丢失的危险因素之一，因此，有必要准确测定脑内不
同区域甲醛的含量为相关研究提供参考．作者通过2, 4- 二硝基苯肼(2, 4-DNPH)偶联高效液相色谱(UV-HPLC)，测定了家猪
脑额叶、顶叶、颞叶、枕叶、海马、小脑、脑干内源甲醛含量(75.5～83.4 μmol/kg) ．采用10%三氯乙酸处理脑组织匀浆(pH=
1.0)，不但可以避免蛋白质及其他分子的干扰，还可以省略现有方法中的萃取步骤，且提高了测试的灵敏度(P 0.05) ．该方
法的回收率约95.96%～102.04%，相对标准偏差(n=5)小于10%．结果表明，改良2, 4-DNPH 法用于脑内源甲醛的测定，其
操作简便、可信度高．
关键词 定量分析，内源甲醛，2, 4- 二硝基苯肼，高效液相色谱，猪脑，认知功能损伤
学科分类号 Q42 ，O65 DOI: 10.3724/SP.J.1206.2011.00407
[23]
甲醛(formaldehyde ，FA)普遍存在于环境中． 质谱联用可用于环境和生物样品中甲醛的测定 ．
3
当空气中含量达到约0.1 mg/m 时，就会引起人的 到目前为止，各脑区甲醛的含量测定尚未见报道．
不适；达到约30 mg/m3 时，就可能危及生命．机 虽然2,4- 二硝基苯肼(2,4-dinitrophenylhydrazine,
[24]
体内也存在甲醛，不同细胞中不同细胞器甲醛的含 2, 4-DNPH) 已经用于液态甲醛的测定 ，但对于含
[1] [2]
量不同 ．甲醛来自于DNA、组蛋白的脱甲基化 ， 蛋白质及其他分子较高的脑组织，该方法的使用需
某些细胞器(线粒体、内质网、过氧化物体等)代谢 要进行优化，即清除蛋白质及其他分子的干扰，从
[3]
过程 ．甲胺、多胺等能通过氨基脲敏感性胺氧化 而提高2, 4-DNPH 与甲醛的反应效率和灵敏度．
[24]
酶(semicarbazidesensitive amine oxidas
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