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摘要
藏药旺拉是一种传统藏药，为兰科植物凹舌兰(∞gD@砖“聊
补气益血、生津止渴、安神增智等功效，药理研究显示旺拉提取物
CE可以有效改善痴呆小鼠、亚急性衰老小鼠的学习记忆能力。
本研究采用大鼠乳鼠前额叶神经元体外培养的方法，观察藏药
旺拉提取物CE对Ap2，．35介导的大鼠乳鼠神经元毒性损伤的作用，
采用免疫组织化学方法鉴定了培养的大鼠乳鼠前额叶神经细胞纯
度；采用MTT方法测定了培养的大鼠乳鼠前额叶神经细胞活性；
采用TUNEL法检测了培养的大鼠乳鼠前额叶神经细胞凋亡情况；
采用免疫组织化学方法检测了培养的大鼠乳鼠前额叶神经细胞中
III蛋白的形态结构及表达。为进一步研究藏药
微管蛋白f3-tubulin
旺拉提取物CE对神经元的保护作用及作用机制提供了新的资料。
主要结论归纳如下：
III禾H
1．对培养第5天的大鼠乳鼠前额叶神经元进行13-tubulin
IIIⅨH性染色为绿色细胞突起，
DAPI免疫组织化学染色，13-tubulin
能较好地显示细胞的形态，DAPI阳性染色细胞核为蓝色，实验结
果显示培养出良好的前额叶神经元，且纯度95％。
2．MTT法和TUNEL法检测细胞的凋亡，发现在培养的大鼠乳
鼠前额叶神经元中加入20
gmol／L的Ap25-35处理24小时对神经细
胞有明显的神经毒性，包括细胞活力的下降、细胞凋亡率的增加。
DAPIonthe
IIIand
immunohistochemical
1．through 13-tubulin
for
culturedfor5 staining
ratPFCneurons positive
neonatal days，the
cell
111was better
cells，showed
[3-tubulin green
the
showedthat
was results
forDAPl blue，experimental
staining
achieved95％．
neuronofPFC
purity
and
anddeath MTT
theneuronal through
2．observing viability
hoursin
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