尼罗罗非鱼雌雄鱼肌肉组织差异表达基因的筛选.pdfVIP

第 卷第 期 水 产 学 报 年 月 文章编号 尼罗罗非鱼雌雄鱼肌肉组织差异表达基因的筛选 吴 奎 梁宏伟 李 忠 王 丹 王春枝 邹桂伟 华中农业大学水产学院湖北 武汉 中国水产科学研究院长江水产研究所湖北 武汉 摘要 应用引物退火控制技术 筛选尼罗罗非鱼雌雄鱼肌肉组织差异表达基因寻找与 雌雄鱼肌肉生长发育相关的候选基因 本实验从同等条件下养殖的尼罗罗非鱼群体中随机选 取雌雄鱼各 尾组成 池采用引物退火控制技术分析了两组个体肌肉组织差异表达基 因 利用 对随机引物差异显示扩增共获得 条 其中 个已知的分别为转录 变体 核糖体蛋白 小白蛋白 样蛋白肌型肌酸激酶 和 转录因子 其余 个为未知的 实时定量分析各差异表达基因在尼罗罗非鱼 雌雄肌肉组织中的表达发现 个差异表达基因中转录变体 与 在尼罗罗非鱼雄鱼 肌肉组织中的表达均极显著高于雌鱼 核糖体蛋白 小白蛋白 样蛋白 肌型肌酸激酶 与转录因子 在尼罗罗非鱼雌鱼肌肉组织中的 表达均极显著高于雄鱼 结果表明应用引物退火控制技术筛选获得了 个可能 参与了雌雄鱼肌肉生长发育调控的为进一步筛选雌雄鱼肌肉生长发育相关候选基因奠 定了基础 关键词 尼罗罗非鱼 肌肉组织 差异性表达基因 引物退火控制技术 中图分类号 文献标志码 引 物 退 火 控 制 技 术 异性的结合技术中产物的假阳性会 是 在 差 异 显 示 技 术 大大降低 近年来技术已经在哺乳动 基础上发展起来的一种克隆差异 物和水产动物发育抗病与性别相关差异表达 表达基因的方法 技术所需引物有 个 基因的克隆中得到了广泛的应用 组成部分 端部分是由 个碱基的随机引物 尼罗罗非鱼属于鲈形 序列组成核心的部分 端部分是由 个碱基 目 丽鱼科 罗非鱼属 组成的通用序列引物中间部分是由一个较低 是世界性 的主要水产养殖对象之 值区域构成的调节子部分 技术需 一 自然界中尼罗罗非鱼主要是 性 进行两步 第一个循环是利用 端核心引 别决定系统而温度和常染色体等也会影响性别 物部分与靶底物结合而引物中间的调节子部 决定 尼罗罗非鱼雌雄鱼在体型生长速度等 分会形成泡状结构能够阻止 端通用引物序 性状方面存在较大的差异尼罗罗非鱼雄鱼较雌