核酸疫苗VR1012／Sj31粘膜免疫诱导小鼠抗攻击感染的研究.pdfVIP

维普资讯 中国寄生虫病防治杂志 2004年 6月 第 17卷第 3期 ChinJ ParasitDisCon June 2004．Vo1．17． No．3 · 论 著 · 核酸疫苗VR1012／Sj31粘膜免疫诱导 小鼠抗攻击感染的研究* 黄复深 ，易新元 一 ，曾宪芳 ，唐连飞。，张顺科。，王林纤 ，LarryMcReynolds。 (1．湖南农业大学细胞工程实验室 ，湖南长沙 410128；2．中南大学湘雅医学院； 3．MolecularParasitologyGroup，New EnglandBiolabs，MA0195，USA) 【摘要】 目的 探讨 日本血吸虫核酸疫苗 VR1012／sj31粘膜免疫诱导小鼠抗攻击感染的保护力。 方法 将实验小 鼠随机分为 5组 ，每组 12只。A组为单磷脂 (MPI)组，B组为 VR1012组 ，c组 VR1012+ MPI组 。D组 为 VR1012／ sj31组，E组为VR1012／sj31+ MPI组 。滴鼻免疫。在第 3次免疫后 2周，每只鼠经腹部感染 4O±1条尾蚴，45d后 宰杀，观察减虫率和减卵率 。在初次免疫前和攻击感染前尾静脉采血并收集粪便 ，ELISA检测血清 内特异性 IgA、IgG 及粪内sIgA水平。 结果 与对照组相比，VR1012／sj31及VR1012／sj31加 MPI滴鼻免疫均可引起小鼠血清 IgG、 IgA和粪 内sIgA升高，且 VR1012／sj31加佐剂滴鼻免疫组抗体 的增幅不加佐剂组 。VR1012／sj31和 VR1012／sj31 加 MPL滴鼻免疫诱导小鼠产生的减虫率分别为 21．7O 和28．82 ，减卵率分别为 27．98 和 4O．72 。二者的减虫率 差异无显著性 (PO．05)，但减卵率后者显著高于前者(PO．05)。 结论 VR1012／sj31滴鼻免疫可引起小鼠产生全 身和粘膜免疫应答及部分抗攻击感染的免疫保护力。 【关键词 】 血吸虫，日本 ；核酸疫苗 ；VR1012／sj31；小 鼠；粘膜免疫 【中图分类号】 R383．24 【文献标识码】 A 【文章编号】 1001—6627(2004)03—0140—03 与非粘膜免疫途径相 比，粘膜免疫可 以诱导机体 中，37C培养 12h。再在 1000ml的锥形瓶 中扩增 ， 产生相当高水平 的 IgA及 IgG抗体反应 ，从而有效地 然后离心收集细菌。按文献要求 的操作程序提取质 提高机体 的免疫保护力 ，并具有给药途径安全 、简便 、 粒 。用 PBS(0．01mol／L，pH7．4)调 整 DNA浓度 ，以 无创伤等优点。血吸虫的生活史有两个阶段与宿主的 适应于滴鼻免疫所需疫苗的体积 。 粘膜接触 ，即肺期童虫移行到肺时童虫与粘膜 的接触 3 动物保护试验 和成虫产 出的虫卵与肠壁或膀胱壁 固有膜 的接触口]。 雌性昆明品系小 鼠，18～2Og，由中南大学湘雅医 研究发现 ，应用 SmGST28、sjGST26等粘膜免疫可诱 学院实验动物中心提供 。小 鼠随机分为 5组，每组 12 导小 鼠产生粘膜和全身免疫应答 ；日本血吸虫疫苗 只。A组为单磷脂 A (MPI，Sigma产 品)组 (对照 候选分子粘膜免疫可诱导小 鼠产生显著的抗攻击感染 组)，B组为 VR1012组 ，C组为 VR1012+MPI组 ，D 的保护力_2]。 组为 VR1O12／si31组 ，E组为