桔皮超氧化物歧化酶的纯化和部分性质研究.pdfVIP

维普资讯 Am JChinClinMed，Mar2005，Vol7，No1 5l · 实验研究 · 桔皮超氧化物歧化酶的纯化和部分性质研究 林国平。戴春秀。李斌元。容小朋 (南华大学生命科学院生物技术教研室，湖南衡阳421001) 关键词 超氧化物歧化酶；桔皮；提取与纯化 ； 部分性质 摘 要 目的 从桔皮中分离纯化超氧化物歧化酶，并对其理化性质进行研究。方法 采用磷酸盐缓冲液提取，经丙酮去 杂蛋 白、丙酮沉淀、G一100纯化等步骤，得纯化的超氧化物歧化酶。并对超氧化物歧化酶的部分性质进行鉴定和分析。结果 以200g新鲜桔皮为起始材料 ，提取超氧化物歧化酶，粗提液的总活力为45l12u．经纯化后最终总活力为23368U，活力回收 约51．8％；起始活力为 120．3U／mL，纯化后的比活力为9r73．7u／rnl，纯化倍数为8．1倍。结论 从桔皮 中可以提取得到超氧化 物歧化酶。本研究具有重要的实际意义和应用价值。 PurificationandCharacterizationofSuperoxideI)ismutasefrom OrangeSkin LIN Guo—Ping，DM Chun—Xiu，LIBin—Yuan，etal (DepartmeT1／ofBiotedmology，NanhuaUniversity，Heng?wtg，Hunan421001，Ch／na) KEYW ORDS superoxidedismutase； orangeskin； separationandpurification； properties ABSTRACT Ot~iective Toesperatenadputcaresuperoxidedismutasefwaorangeskirtnadtostudys0n【eproper6esofptrritiedSOD． Methods OS Dwaspurifiedfrom orangeskinbyorganicsolventtoremoveprotein，condensation，acetoneprecipitationnadG一100chroma— tog=phy． Results Thepurifide superoxidediamutaseobtainde from200gram oforangeskin 6sessedatotalactivityof23368units，aspe— cificactiviytof973，7U／mLproteinWas reached．ocrresponding to8．1一foldpurification．TheyieldWas51．8％ ， Conclusions Superoxide dianautaseCna beespaattde from orangeskin． 超氧化物歧化酶 (superoxidedismutase，SOD)是 1 材料与方法 广泛存在于生物体内的一类金属酶，自1969年Mc— 1．1 从桔皮中提取分离纯化OSD的实验路线 Cord和 Fridovich发现该酶并阐明其生物学功能以 [提取] [离心] [去杂蛋白] [丙酮沉淀] 桔皮一 提取液一 粗提液— —— 提取液— —— 沉淀 来，有关 的理论和应用研究迅速发展．现已证实， 溶【解] G【一100柱分离J 【洗脱J l浓缩J SOD不仅在生物体内对抗氧化、解毒等起重要作用， — — — — — — — — — + 一 洗脱液一 S0D 1．2 桔皮SOD的分离和纯化 而且也有抗辐射、抗肿瘤及抗衰老等