用同步辐射X射线荧光分析研究硝酸镧对单个平滑肌细胞内重要元素的影响.pdfVIP

维普资讯 第27卷 第 l2期 核 技 术 Vo1．27，No．12 2004年 l2月 NUCLEARTECHNIQUES December2oo4 用同步辐射X射线荧光分析研究硝酸镧对单个 平滑肌细胞内重要元素的影响 韦 日生 安丽芝 黄宇营 韩红梅 凤志慧 张孙曦 何 伟 1(北京大学基础医学院生物物理教研室 北京 100083) 2(中国科学院高能物理研究所 北京 100049) 摘要 为了进一步分析稀土元素镧化合物——硝酸镧 (La(NO3)3)在不同浓度和不同作用条件下对培养的单 个大鼠平滑肌细胞内重要元素的影响，我们继续应用同步辐射x射线荧光技术分析 10-4mol／L的La(NO3)3 对单个细胞内重要元素水平的影响。实验观察到 10-4mol／LLa(NO3)3即刻和持续作用均能使单个平滑肌细胞 内La显著升高，与此同时Ca、P、S也发生高度相关性的变化，K、Fe、Cu、Zn、Ni等元素含量也有不同程 度的改变。实验结果提示：La¨进入细胞内并影响细胞内某些重要元素的分布，这可能是La¨引起细胞增殖 和细胞毒性的机制之一。 关键词 同步辐射，镧，钙，平滑肌，单个细胞 中图分类号 R331．3 2 细胞中的重要元素 如Ca、K、P、S、Fe、Cu、 用于生物样品微区元素分布扫描分析L5J。近几年， zn、Ni等是与生命活动有关的基本成分，它们不仅 国外报道6J【利用这一技术研究单个细胞内重要元素 参与细胞生理、生化及物质代谢等一系列生命活动， 的空间分布，并取得良好的效果。本课题组利用北 而且也是机体内环境稳定与平衡的必要条件。钙是 京同步辐射装置 (BSRF)提供的这一技术，曾经报 维持细胞正常理化活动的重要元素，它不仅参与细 道7【J了低浓度 L (10～molL／La(NO3)3)对单个平 胞遗传物质 DNA的合成与复制，而且还作为细胞 滑肌细胞的作用，结果显示L 进入细胞内，可影 内第二信使参与细胞内信号的传导，同时与突触神 响细胞内其他元素如 Ca、K、P、Fe、Cu、Zn、Ni 经递质的释放、肌细胞的机械一收缩耦联等有密切 含量的改变 。为了进一步系统分析硝酸镧 关系。锌主要参与酶活性中心的构成，如DNA聚 (La(NO3)3)在不同浓度和不同作用条件下对培养的 合酶、RNA聚合酶，碱性磷酸酶等在缺锌时酶的活 单个大鼠平滑肌细胞内重要元素的影响，本课题组 性将降低。铜与锌构成铜锌一超氧化物酶而起到抗 继续应用这一技术，分析 10 mol／L的La(NO3)3 氧化损伤和抗辐射损伤的作用。高钾低钠会导致机 即刻和持续作用对单个细胞内重要元素水平的影 体内水盐代谢失调和酸碱平衡失调。 响，进一步阐明La3对细胞作用的可能机制。 自上世纪60年代稀土元素镧复合物被用作农作 物生长添加剂以来，镧对人类健康的影响受到广泛 1 样品制备和实验方法 关注。目前越来越多的研究表明稀土元素镧对细胞 1．1 试剂、溶液和细胞培养 具有生物学效应 引。本课题组最近研究4【J表I~)]La3 在低剂量浓度范围(10一 —l0 mol／L)促进平滑肌 将纯度为99．9％的稀土氧化物转化为稀土硝酸 细胞的增殖，高剂量浓度范围(1c_『。一l0 mol／L) 化合物，EDTA标定浓度后用 Tris．HCI缓冲液配制 对细胞有毒性作用，抑制细胞的生长，并提示L 成浓度为 10 mol／L的La(NO3)3母溶液。实验时 的促增殖作用可能是L 进入细胞后进行的。但 目 再用 Tris．HCI缓冲液稀释成终浓度为 10-mol／L的 前对La3的很多生物学作用机理并不完全清楚。 La(NO3)3溶液。