光谱学研究重金属离子参与下对甲萘威与ctDNA相互作用的影响.pdfVIP

第28卷，第6期 光谱学与光谱分析 20O and June，2008 8年6月 SpectroscopyspectralAmlysis 光谱学研究重金属离子参与下对甲萘威与ctDNA相互作用的影响 刘立栓，王 忻，杨宝元，孙 英。 农业部农药化学与应用技术重点开放实验室，中国农业大学理学院，北京 100094 摘要应用紫外、荧光光谱分析方法，研究了离体条件八种重金属参与下对农药甲萘威与小牛胸腺DNA 的相互作用的影响。当有不同重金属离子参与时，甲萘威的猝灭常数及其结合位点数都发生了不同的变化。 C02+Zn2+Cdz+C一+。通过400m01．L_1的不同金属离子对ctDNA的作用研究，得出不同离子对 光谱所得结果表明不同重金属离子对DNA的作用机理不同。 关键词甲萘威；DNA加合物；重金属离子；紫外光谱；荧光光谱 中图分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号：1000-0593(2008)06—1353_03 箱中备用；甲萘威由中国农业大学农产品质检中心提供(纯 引 言 度95％)，配成40 DNA作为生命体的遗传物质，它的损伤如得不到修复， 纯，均配成o．02nlo卜L_1的使用液；缓冲液由lo姗01． 可能导致基因突变、致癌、遗传性疾病等危害生物体生存的 后果，是相当有害的[1]。重金属离子广泛存在于环境中，可 7．11；实验用水均为二次蒸馏水。 以通过各种途径进入生物体，重金属在生物体内以离子或螯 1．2实验方法 合物的形式存在；其中有些金属螯合物或离子能识别、损伤 n儿的缓冲液与1 向数只10n1L的试管中分别加入l 及断裂DNA，对这些金属的研究已成为近年来生物无机化 lIlL的甲萘威溶液，再依次分别加入o～4mL的c卜DNA溶 学的热点之一[2]。甲萘威作为氨基甲酸酯类农药被人们广泛 min，分别测定溶 液，用水定容，将上述溶液在37℃水浴30 应用，已有实验证明甲萘威可以与c卜DNA通过嵌插作用产液的荧光强度，平行测定三次取平均值。 生加合物，而DNA加合物可能会在生物体环境下逃避生物 向数只10r11L的试管中分别加入1n1L的缓冲液与1 体的自身的修复[3]。 mL的甲萘威溶液和o．5n1L的金属离子，再依次分别加入o 随着越来越多的农药与重金属进入生态环境系统，其潜 ～4 在的危害性也越来越显现出来。所以研究金属离子和农药共 浴30lllin，分别测定溶液的荧光强度。平行测定三次取平均 存时对DNA的作用及其相互影响对于揭示复合污染物之伺 值。 的交互作用的本质及影响因素，具有重大意义。 向lon1L的比色管中分别加入1IIlL的缓冲溶液与1 mL ct-DNA溶液，再向其中加入不同浓度的重金属溶液，37 1实验部分 ℃水浴30min，观察其紫外吸收变化，平行测定三次取平均 值。 1．1仪器和试剂 日立F-4500荧光分光光度计；电热恒温水浴锅；PH孓 2结果与讨论 3C精密pH计；紫外一可见分光光度计(美国PE)；小牛胸腺 2．1 金属离子对n-DNA作