红豆杉细胞组织培养生产紫杉醇的综述.pdfVIP

综合论坛 CHARMfNG CHINA 红豆杉细胞组织培养生产紫杉醇的综述 查杰 (重庆工贸职业技术学院，重庆 408000) 摘要：红豆杉是世界上公认的濒临灭绝的天然珍稀抗癌植物，是第四纪冰川遗留下来的古老树种，因为它可提炼紫杉醇而倍受关注 【1]。 红豆杉有人工种植途径，植物组织培养途径，生物合成途径，化学合成及微生物生产途径，人们普遍认为组织培养是缓解需求的重要方法，本文 主要对近年来红豆杉细胞纽织培养技术进行综述。 关键词：红豆杉；紫杉醇；细胞培养 1．简介 选方法4【】。本文主要从红豆杉细胞组织培养等生物技术角度，对 红豆杉又名紫杉，是世界公认的濒临灭绝的天然珍稀抗癌 近 1o年其培养过程 、培养条阵及其优化等方面进行综述。 植物，红豆杉的提取物紫杉醇，因具有独特的抗癌机理 ，被认为 2．红显杉细胞培乔技 术 是人类同癌症抗争的最有利武器。在全世界共有十一种，目前我 细胞培养利用组织和细胞培养方法代替天然红豆杉来提取 国共有四个种和一个变种，即云南红豆杉、西藏红豆杉 、东北红 紫杉醇，已成为近年来红豆杉研究的一个重要课题。细胞培养法 豆杉、中国红豆杉和南方红豆杉 (变种)。红豆杉产生的二萜类次 生产紫杉醇的一般步骤为：诱导愈伤组织一 继代培养一建立悬 生代谢产物一紫杉醇是当今世界公认的广谱、高活 }亢癌药物， 浮培养—扩 大培养。 具有独特的抗癌机理，因此红豆杉倍受关注2『]。 (1)诱导愈伤组织 紫杉醇是红豆杉属植物中的一种复杂的次生代谢产物，也 红豆杉属植物由于其本身所具有的特殊生『质，诱导其愈伤 是目前所了解的惟一一种可以促进微管聚合和稳定已聚合微管 组织是比较困难的，各种条件均对愈伤组织的诱导产生不同程 的药物。同位素示踪表明，紫杉醇只结合到聚合的微管上，不与 度的影响。外植体的选择植体条件的影响：到目前为止，被用来作 未聚合的微管蛋白二聚体反应。细胞接触紫杉醇后会在细胞内 为诱导红豆杉愈伤组织外植体的有针叶、幼茎、树皮、形成层、种 积累大量的微管，这些微管的积累干扰了细胞的各种功能，特别 子及假种皮等，主要集中在 1~7年生的枝条、叶和幼嫩 茎段。以 是使细胞分裂停止于有丝分裂期，阻断了细胞的正常分裂。通 幼茎、形成层或树皮诱导愈伤组织的效果最好，诱导率亦高，其它 过 Ⅱ一ⅢJI 研究，紫杉醇主要适用于卵巢癌和乳腺癌，对肺癌、 的外植体诱导能力较差或根本诱导不到愈伤组织。不同种属有 大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤、脑瘤也都有一定疗效。 不同优选的组织作为外植体。另有实验发现，以紫杉醇含量高的 解决药源的问题的方法说来应该就两个大方面 ，即人工合 外植体作为诱导材料，可获得紫杉醇产量高的细胞系。云南红豆 成和生物技术方法，也就是化学合成和利用相关生物技术解决 杉和中国红豆杉愈伤组织中紫杉醇含量较高，是获得紫杉醇高 紫杉醇的药源问题。但是，由于紫杉醇化学结构的复杂眭，这就 产愈伤组织系的外植体的较佳来源 5『]。 意味着紫杉醇的化学合成在经济上是不可行的：而且紫杉醇的 (2)培养基的选择 半合成原料，例如从针叶红豆杉所分离得到的巴卡亭Ⅲ，也要从 培养基及培养条件的影响：许多培养基添加蔗糖及外源激 红豆杉属植物中提取获得3【】。这样看来，人工合成的方法，不论 素均 可诱导外植体形成愈伤组织。其中以培养基B5、SH及 是全化学合成还是~-4g合成，其可行 艮低。 6，7一v为较佳，诱导率较高，培养基中激素组成及 其浓度和组合 从生物技术角度来看，人们主要从遗传转化、人工栽培 、真 对愈伤组织的诱导起着重要的作用。培养基中含 1．O~2．0mg／ 菌生产和植物细胞培养等几个方面尝试解决紫杉醇的药源问 L2，4一D或含有 2，4一D的激素 ，对愈伤组织的诱导极为有利 培 题，而其中的细胞培养因具有众多优点而成为商业化生产的首 养基中的碳源一般为蔗糖浓度是 1．0 0．0％(w／v)。在固体培养 音乐有助于学生记 力的发展。在刚刚记事的时候身边会 和完善