荧光及吸收光谱法研究β环糊精硫堇包合物与DNA的相互作用.pdfVIP

第27卷，第12期 光谱学与光谱分析 2O07年12月 and Analysis December，2007 SpectroscopySpectral 荧光及吸收光谱法研究伊环糊精一硫堇包合物与DNA的相互作用 童晓青1’2，吕鉴泉H，孙娟1，龚仲红1 1．湖北师范学院生化分析技术湖北省重点实验室，湖北黄石435002 2．华中师范大学化学学院，湖北武汉430074 摘要用荧光及可见光谱方法研究了p环糊精对硫堇的包合以及p环糊精一硫堇包合物与DNA的相互作 L·morl(可见光谱法)、444 用。在pH7．2的PBS缓冲液中，p环糊精以1：1包合硫堇，包合常数为527 L·mol_1(荧光法)；DNA的引入使环糊精一硫堇包合物的吸收波长红移，吸光峰强度降低；环糊精一硫堇包 L·moll。。荧光及可见光谱数据表明，环糊精一 合物的荧光发生蓝移并有猝灭现象，猝灭常数为6．12×104 硫堇包合物以嵌入方式与DNA发生相互作用，其结合比是1：1。 关键词相互作用；硫堇；p环糊精；包合物；DNA 中图分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号：1000—0593《2007)12—2538—04 引 言 步处理，摩尔浓度由紫外分光光度计标定，e一6600L· 生命科学研究中，DNA、蛋白质等生物大分子的结构与 生理功能是其核心内容，包括药物在内的活性分子与它们的 用水为二次蒸馏水。 相互作用成为的令人关注的前沿研究领域之一[1’2]。 1．2实验方法 m01．L17．2 作为一种药物和活性探针，具有平面刚性芳环结构的噻 在含1．o×10一5m01·L1TH的o．2pH 吩类小分子一硫堇，与DNA[3。5]、蛋白质[6]相互作用、结构 与功能等已经引起了化学家、生物学家和医学家的关 容，摇匀。紫外一可见吸收光谱研究时，以pH7．2的PBS缓 冲液为参比测量190～700nrn内的光吸收，荧光光谱研究 注[718]。鉴于硫堇类药物与DNA的相互作用是在生理条件 下发生的，生命体内大量存在的多糖物质可能对药物的形态 时，以550眦为激发波长，测量570～750mn范围的荧光 有影响。因此，在生命体内生物分子具有超分子的特征，借 强度。 助于环糊精的模拟酶功能，将药物筑构成超分子体系并用于 研究它们与生物分子的作用，有可能从药物的定向释放以及 2结果与讨论 作用机制方面获得一些新认识。 本文尝试性地用荧光及可见紫外光谱技术探讨p环糊精 2．1伊环糊精对硫堇的包合 与硫堇的包合反应以及p环糊精一硫堇包合物与DNA的相互 作用，并就作用模式及性质进行了总结。目前，该方面的研 的荧光光谱。从图可见，随伊CD浓度的增大，硫堇的荧光强 究尚未见有文献报道。 时，硫堇的荧光强度不再有明显的增强。荧光增强的原因可 1实验部分 能是伊CD的疏水空腔提供的非极性环境有利于对硫堇的包 合作用，从而增大了硫堇的荧光量子产率。 1．1仪器与试剂 包合硫堇的反应进行了计算。结果显示，两者以1：1形成包 日立公司产F_4500荧光分光光度计和U-3010紫外一可 见分光光度计。