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Vd．28，Nn 第28卷，第7期 光谱学与光谱分析 7，ppl621—1625 2Oo8年7月 and AnalySis July，2008 spectroscopySpectral 荧光偏振免疫分析测定磺胺甲基嘧啶研究 王战辉，张素霞，沈建忠。 中国农业大学动物医学院，北京100094 isothio— 摘要磺胺甲基嘧啶(sul矗哪er配i鹏，SMR)的芳伯胺基与荧光素异硫氰酸钠异构体I(fIuo抻scein cyanate，FITC)的异硫氰基在常温下可以发生偶联反应，经薄层色谱分离之后，可以得到sA很的FITC荧光 标记物(Tracer)SMR_FITC。应用荧光偏振免疫分析(nuoreScencepolarb隐tionimm眦0assay，FPIA)，以sMR 单克隆抗体为竞争免疫试剂，优化了检测条件，建立了SMR的FPIA检测方法。在选定的条件下，s^很的 半数抑制量(IC50)为23．4119·mL～，最低检测限量为2．3ng·lTlI。一，检测范围为5．4到218．8ng·n儿～， 可以达到食品中S№的最高残留限量要求。同时对16种磺胺类药物的交叉反应做了初步研究，结果显示 25％和8．6％，对其他磺胺类药物的交叉反应率均低于5％。 、 关键词荧光偏振免疫分析；磺胺甲基嘧啶，荧光标记物；交叉反应率 中图分类号：()657．3文献标识码：A 文章编号：1000_0593(2008)07一162l加5 蛆y，FPIA)，是一种简单、可靠、快速和高效的免疫分析方 引言 法拍J]，可以加快筛选检测的速度，提高检测效率。国外有人 TDx建立 利用Abbott实验室开发的自动荧光偏振仪Abbott 磺胺甲基嘧啶(sulf栅erazine，SMR)是兽医临床常用的 磺胺类药物。食用磺胺类药物的动物性食品后，会在体内积 检测兽药残留的技术尚未开展，本文应用实验室自制的 累，给人类健康带来潜在危害，同时大量应用磺胺类药物可 s^很单克隆抗体和荧光分光光度计建立了SMR的FPIA方 能导致细菌产生耐药性，致使药物生命周期缩短。欧盟、美 法，为FP认技术应用于食品中SMR的检测提供了可能。 国和我国农业部等许多国家和地区限定磺胺类药物总量和单 个药物的最高残留限量(M融。)为100ng·g-1[1]。 1实验部分 检测磺胺类药物的主要方法是传统的色谱方法，如薄层 色谱法[2]、高效液相色谱法[3]和液质联用[4]，但是这些方法1．1仪器与试剂 有些需要昂贵的设备，熟练的操作人员，有些实验过程复杂 ．Cary Eclipse型荧光分光光度、偏振片、玻璃比色皿(美 或者灵敏度较低，不适合大量样本的快速分析，所以迫切需 国vari锄公司)；S胀等16种磺胺类药物、荧光素异硫氰 要一种快速简便的分析技术。免疫分析方法可以作为色谱方 iITl— nlITlx20 法的替代方法，尤其是酶联免疫吸附分析(enzyme_link上(美国SigrIla公司)；硅胶GF254薄层色谱板(