乙酸渗漏型丙酮酸高产菌的选育.pdfVIP

∞，二卷瓤3蛸 i业微生物 Vtll32 No3 !1)I】：卸qJj Industrlal ＆D【2002 MIcrobi山gy 乙酸渗漏型丙酮酸高产菌的选育 刘立明， 李 寅， 堵国成， 钱崎峰， 陈 坚 ‘江南大学教育部工业生物技术重点实验室无锡214036’丁12n 摘要 透明圈较大的茵落，经初筛和复筛，发现了1譬，n6朋mwSH—LQ307生产丙酮酸能力强且稳定，以 2 己酸为补充碳源摇瓶培养48h，其丙酮酸产量(46g／L)比出发菌株(38．3dL)提高了21％。采 用该菌株在5L发酵罐上进行4批发酵实验，丙酮酸产量在64h最高可达68．7g／L．对葡萄糖的转 化率为0651 gk。 关键词：光滑球批酵母； 丙酮酸发酵； 乙酸渗漏营养缺陷型； 丙酮酸脱羧酶(PDc) 丙酮酸(I’yruvtcacid)是糖代谢中重要的中间产 1材料与方法 物．丙酮酸是多种氨基酸、维生素及其它物质的重要 前体，广泛应用于化]i、制药及农用化学品工业中。 1．I菌种 发酵法生产丙酮酸具有原料成本低、来源广、产品纯 出发菌株为光滑球拟酵母(％r“，0加如gk6m一 度高、反应条件温和等许多优点，引起了越来越多的 研究者的兴趣…。 醇(B。)和生物素(Bio)的营养缺陷型。 在以前的研究中，本研究室经多次改良获得了 1．2培养基 1．2．1斜面和种子培养基 一株光滑球拟酵母(丁打Mbpsisg，Ⅱ6№f“)wSH— II’303，是硫胺素、生物素、烟酸和吡哆醇的营养缺陷 参见文献… 型，即需要这些维生素来维持生长和积累高水平的 1．2．2发酵培养基(I。) 葡萄糖，100 丙酮酸，能以氯化铵为唯一氮源”】。还研究了营养 g；氯化铵，7g；KH2P04，5g；Mgs— g；KcI，5g；盐酸硫胺索20pg；生物 条件、维生素、供氧控制模式等对其发酵生产丙酮酸 rv‘7H20，0．8 的影响以及，厂、譬如厶rⅡ地wsH—IP303过量合成丙素10pg；烟酸4mg；盐酸吡哆醇100pg；核黄素 酮酸的代谢特征”。1。在摇瓶实验(48h)和300L50”g；CaC03，40g(摇瓶时添加)；乙酸钠添加量视 发酵罐(68 3 实验而定，最佳添加量为6 5．0，自来水配制。 h)中丙酮酸积累水平分别为38g／L和 g；pH 558 g，L，对葡萄糖转化率分别为0．525 1．2．3基本培养基(MM) g／g和 0 葡萄糖，10 553 g；NH．cl，3g；KH2PO。，1g；Mgs0。 g／g”1。但发酵液中副产物乙醇的含量较高 ·7HO，O．5