禽类多瘤病毒APV-1的cDNA病毒突变体构建.pdfVIP

禽类多瘤病毒APV-1的cDNA病毒突变体构建.pdf

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32 3 ( ) Vol. 32 No. 3 第 卷第 期 中南民族大学学报 自然科学版 20 13 9 Journal of South-Central University for Nationalities (Nat. Sci. Edition) Sep. 20 13 年 月 禽类多瘤病毒APV-1 的cDNA 病毒突变体构建 , , , , 李 劲 高 奎 李可可 刘 浏 刘学群 ( , 430074) 中南民族大学生命科学学院 武汉 , APV-1 摘 要 为进一步研究禽类多瘤病毒晚期基因多顺反子翻译调控的分子机制 设计和构建了与野生型病毒 AUG agno-1a 7 . APV-1 cDNA 相同的在 位点有 突变区和 个插入氨基酸的新型重组病毒 用碱裂解法提取了 克隆 pHL1003 , Acc I , T4 agno 全长线性目的片段由 部分酶切后回收 再用 连接酶将合成的 插入片段磷酸化后与目的片段 , E. coli DH10b . PCR ,PAGE DNA 连接得到了重组质粒 最后转化至 感受态细胞中筛选阳性克隆 经 和 测序验证获 得了APV-1 突变cDNA 克隆. ;cDNA ; ;PCR ;DNA 关键词 禽类多瘤病毒 克隆 重组质粒 测序 中图分类号 Q933 文献标识码 A 文章编号 1672-4321 (2013)03-0022-04 Construction of the cDNA Mutant Recombinant from Avian Polyomavirus 1 Li Jin ,Gao Kui ,Li Keke ,Liu Liu ,Liu Xuequn (College of Life Science ,South-Central University for Nationalities ,Wuhan 430074 ,China) Abstract To study the molecular mechanism of the poly-cistronic translational control of avian polyomavirus late genes , new recombinants of APV-1 virus with intact agno-1a mutant region plus 7 amino acids inserts at its AUG site were designed and constructed. APV-1

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