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第 26卷 第 4期 海 洋 水 产 研 究 Vo1．26，NO．4
2 0 0 5 年 8月 M ARINE FISHERIESRESEARCH Aug．，2005
水产 品中磺胺二 甲嘧啶间接竞争
ELISA检测法的建立
英 瑜 李 健
(中国水产科学研究院黄海水产研究所 ，青岛 266071)
(中国海洋大学生命科学与技术学部 ，青 岛 266003)
摘要 将磺胺二甲嘧啶 (Sulfamethazine，SM )与牛血清 白蛋白(BSA)、人血清 白蛋 白(HSA)偶联 ，
分别作为免疫原及包被原 ，建立 了水产品中磺胺二 甲嘧啶 间接竞争 ELISA检测方法。实验结果表
明，理想的磺胺二甲嘧啶人血清 白蛋 白(SM。HSA)包被抗原浓度为 1mg／I，酶标二抗 (羊抗 兔 IgG
HRP)工作浓度为 1／1000，多抗 (SM 一PcAb)工作浓度为 1／3200，最适检测范 围为 10～200ug／i ，
最低检测限为 1．89 g／I ，本实验所建立间接竞争 ElISA检测方法的孔间差异为 2．56 ，板 间差异
为 5．14 ，实验重复性好 。在实验浓度范围内，磺胺二 甲嘧啶 (Sulfamethazine)的抗血清与磺胺嘧啶
(Sulfadiazine)、磺胺 甲嗯唑 (Sulfamethoxazole)、氯霉素 (Chloramphenico1)、恩诺 沙星 (Enrofloxa—
cin)、甲氧苄啶 (Trimethoprim)、呋喃唑酮 (Furazolidone)等可能会 因同时使 用而导致共 同残 留的抗
菌药物未显示免疫交叉反应性 ，与结构相近的磺胺类药物磺胺嘧啶 的交叉反应性为 11．0 。所建立
的方法有较 高特异性和灵敏度 ，适合磺胺二 甲嘧啶 的快速筛选。整个测定时间为5～6h。
关键词 磺胺二 甲嘧啶 (SM。) ciEIISA 残 留检测
中图分类号 S948；TS207．5 3 文献识别码 A 文章编号 ：1000—7075(2005)040045—08
EstablishmentofindirectcompetitiveELISA methodforquantitative
analysisofsulfamethazinein aquaticproduct
YING Yu LIJian
(’Yellow SeaFisheriesResearch Institute，ChineseAcademyofFisherySciences
． Qingdao266071)
(()ceanUniversityofChina．Qingdao266003)
ABSTRACT SM zhaptenwascoupledwithBSA andHSA byimprovedDiazotization proce
dure．Theantibodieswereobtained successfullyby immunizingNew Zealandrabbitswith SM 。一
BSA．SM2一HSA wasaman—madecoatingantigen
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