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技 术 手 册 PureYield™ 质粒大提系统 PureYield™ Plasmid Maxiprep System A2391 / A2392 / A2393 产品使用说明 注意：此试剂盒必须配合真空泵和真空多联器 （如 Vac-Man®实验室真空多联器，20个样品位，目录号 A7231 ）使用 修订于12/12 编号CTM280 PureYieldTM 质粒大提系统 所有技术文献的英文原版均可在/tbs 网站获得。请访问该网址以确定 您所使用的技术手册是否为最新版本。如果您在使用本试剂盒的过程中有任何问题，请 与Promega 北京技术服务部联系。 电子邮件：chinatechserv@ 1. 产品描述2 2. 产品组分和储存条件2 3. 所需仪器设备、材料和溶液配制4 4. PureYieldTM 质粒大提系统操作流程5 4.A ．制备和裂解细菌细胞培养物5 4.B ．DNA 纯化6 5. 补充信息9 5.A．PureYieldTM 质粒大提系统使用注意事项9 5.B ．质粒和大肠杆菌菌株的选择和准备10 5.C ．选择细菌菌株11 5.D．缓冲液和溶液配方12 6. 疑难解答13 7. Vac-Man®实验室真空多联器的使用15 7.A ．产品描述15 7.B ．装配和操作16 8. 相关产品17 普洛麦格（北京）生物技术有限公司 ·北京市东城区北三环东路36 号 ·环球贸易中心B 座907-909. 邮编 100013 ·电话：800 810 8133 （免费），010 ·网址 CTM280 修订日期12/12 第1 页/共17 页 1. 产品描述 随着研究从DNA 测序转向基因功能分析，人们对快速大量提取高质量质粒DNA 方法 的需求也与日俱增。PureYieldTM 质粒大提系统旨在提取高质量的质粒DNA 用于真核转染和 体外表达实验。该系统提供基于硅膜结合柱的快速纯化方法，60 分钟内即可纯化得到质粒 DNA ，与利用二氧化硅树脂或其他膜结合柱的方法相比，大大缩短了纯化所需的时间。 PureYieldTM 质粒大提系统中还包含了独特的去内毒素洗液（Endotoxin Removal Wash ）， 用于从纯化的质粒DNA 中去除大量的蛋白质、RNA 及内毒素污染物，以增强如真核转染、 体外转录及偶联的体外转录/翻译等敏感应用的稳健性。纯化过程无需对质粒DNA 进行异丙 醇沉淀，可快速得到高浓度的纯化的质粒DNA 。PureYieldTM 质粒大提系统可以从250ml 转 化了高拷贝质粒的细菌过夜培养物中，纯化得到多达1mg、A260/A280 ＞1.7 的质粒DNA 。 PureYieldTM 系统需要使用真空泵和真空多联器（如 Vac-Man®实验室真空多联器，20 个样品位 [Vac-Man® Laboratory Vacuum Manifold ，20-sample，目录号A7231] ），以及用于 澄清裂解物的固定角转子离心机；如果通过离心法洗脱，还需要水平转子（swinging bucket rotor ）台式离心机。为了得到最佳的DNA 回收率和产量，也可以使用EluatorTM 真空洗脱器 （EluatorTM Vacuum Elution Device ，目录号A1071 ；见4.B 部分）通过真空法来洗脱。使用 Elua