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人肝癌细胞原位种植裸鼠后VEGF的表达 作者：杜滂，魏经国，李和平，王耀程，邬秋珍，黄进 【关键词】 肝肿瘤 　　关键词: 肝肿瘤，内皮，血管;内皮生长因子;血管造影术 　　摘 要:目的 通过检测裸鼠肝癌模型中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达，观察血管造影的表现，探索VEGF与肝癌发生、发展之间的关系. 方法 将裸鼠25只平均分成5组，1组为对照外，其余20只原位种植人肝癌细胞，分别于1，2，3，4wk行动脉造影及用免疫组化的方法检测VEGF的表达. 结果 VEGF的表达与肝癌的发生、发展成正相关，术后1wk组VEGF表达成弱阳性，术后2wk组VEGF表达成阳性，术后3wk组及术后4wk组VEGF表达强阳性.血管造影显示术后两周组肝脏血管开始有增生及扭曲，3wk及4wk组血管改变更加明显. 结论 VEGF与肿瘤的生长、发展有密切的关系，血管造影显示为多血供的肿瘤VEGF表达较强. 　　Keywords:liver neoplasms，endothelium，vascular;endothe-lial growth factors;angiography 　　Abstract:AIM To study the role of VEGF in cancer devel-opment，progression，growth and metastasis.METHODS Twenty-five nude rats were divided into five groups.HCC-7712cells were planted in the liver of twenty nude rats.Then，we examined the concentration of VEGF in the livers after one week，two weeks，three weeks and four weeks re-spectively.At the same time，we made angiography of liver.RESULTS The relationship between VEGF and cancer de-velopment，progression，growth and metastasis was close.Angiography show vessels of liver became complicated.CONCLUSION VEGF is closely related to the develop-ment，growth，progression and metastasis of cancer.The more tumor vessels are seen，the higher the expression of VEGF may be. 　　0 引言 　　众所周知，肿瘤的生长、局部浸润、及远处转移与瘤血管的形成关系密切.人们发现血管内皮生长因子（VEGF）能提高血管的渗透性并促进毛细血管的生成.据报道，VEGF在许多人类肿瘤中都可表达，如:颅内的星形细胞瘤、鼻咽癌、肾癌、乳腺癌等等 ［1，2］ .多篇文献亦报道VEGF在肝癌中有过表达，但VEGF与肿瘤血管的形成之间的关系及机制并不十分清楚［3-7］ .在本研究中，我们将人的肝癌细胞HCC-7721原位种植于裸鼠肝脏内，采用血管造影的方法观察肿瘤进程中肝脏血管尤其是动脉的变化.分别于1，2，3，4wk取标本做HE及免疫组化染色，以观察原位种植肝癌的病理学改变与VEGF表达的关系，初步探索VEGF在肿瘤进程中的作用. 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　裸鼠25只，鼠龄8wk，雌雄不限，体质量18～22g，无菌环境下饲养及手术操作.25只鼠分作5组，每组5只.试验组分别为正常对照组、术后1wk组、2wk组、3wk组和4wk组.10g L-1 戊巴比妥钠50mg kg-1 ip麻醉后，于右上腹切口，逐层分离暴露肝右叶，注入浓缩瘤细胞0.08～0.1mL，平均细胞数5×106 个，逐层缝合备用.自鼠尾静脉手推注入760g L-1 泛影葡胺0.5mL，1s注完，注射的同时开始拍片，拍片速度为每秒四幅.血管造影后，立刻剪开裸鼠胸腔，暴露心脏，用6号针头由左室进入主动脉，生理盐水30mL冲洗，40g L-1 多聚甲醛50mL灌注固定后，取出肝脏置于40g L-1 多聚甲醛中保存. 　　1.2 方法