尿激酶型纤溶酶原激活因子介导的卵巢上皮癌细胞浸润转移体外的实验研究.pdf

现代妇产科进展2009年8月箍 鲞筮 g !z!!：垒g：兰Q ： ： ：： 论著 · 尿激酶型纤溶酶原激活因子介导的卵巢上皮 癌细胞浸润转移体外的实验研究 覃 捷 ，李 力 ，张洁清，张 玮，黎丹戎 (广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科，南宁 530021) 【摘要】 目地：探讨尿激酶型纤溶酶原激活因子在卵巢上皮癌浸润转移中的作用机 制。方法：用RTPCR技术从人卵巢上皮癌组织总RNA中逆转录 uPA基因cDNA全长， 克隆至pGEMITEasyVector，鉴定后与真核表达载体PCMV—HA连接，酶切及测序。用脂 质体法将重组质粒 DNA转染至SKOV3细胞。加压筛选并培养 PCMV—HA-uPA及对照细 胞。分别用RT—PCR和Westernblot方法检测转染前后 SKOV3细胞 uPA的表达。细胞增 殖能力测定用四甲基偶氮唑蓝 (M1Tr)法和集落形成实验 ，细胞周期测定用流式细胞仪 法，细胞体外侵袭，迁移和黏附能力测定分别采用 MatrigelInvasion，TranswellMigration和 A