抗水貂肠炎病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定.pdfVIP

中国兽医科学 2009，39(03)：227—232 ChineseVeterinaryScience 中图分类号 ：S855．3：S852．65 文献标志码 ：A 文章编号 ：1673—4696(2009)03—0227—06 抗水貂肠炎病毒单克隆抗体 的制备及其 生物学特性鉴定 王建科 ，程世鹏 ，闫喜军 ， 易 立 ，罗国良 ，柴秀丽 ，罗 彬 ， 口 天 威 ，赵传芳 (1．中国农业科学院 特产研究所 ，吉林 吉林 132109； 2．吉林中特生物技术有限责任公司，吉林 吉林 132109) 摘要：将水貂肠 炎病毒 SMPV一¨株纯化后免疫4～6周龄雌性 BALB／c小鼠，取其脾细胞与 SP2／O骨 髓瘤细胞进行融合 ，经亚克隆和间接 ELISA筛选，获得 了8株稳定分泌抗水貂肠炎病毒 sMPV一1l株单克 隆抗体的杂交瘤细胞株 ，分别命名为D3、H5、F5、F4、A9、B7、H11和 H8。经过鉴定 ：其腹水 ELISA效价分 别在 1：6．4×10。和 1：2．56×10之 间；且与犬瘟热病毒、阿留中病病毒、犬腺病毒不发生交叉反应 ；而与水 貂肠炎病毒、犬细小病毒和猫泛 白细胞减少症病毒呈特异性反应 ；这 8株单克隆抗体均为 IgG类型。 关键词 ：水貂肠炎病毒；单克隆抗体 ；生物学特性 Preparation and biologicalcharacteristicofmonoclonal antibodiesagainstm inkenteritisvirus WANGJian—ke，CHENGShi—peng ，YAN Xi—jun ，YILi，LUOGuo—liang ，CHAIXiu—li， LU0 Bin ，W U W ei，ZHA0 Chuan—fang。 (1．InstituteofSpecialw EconomicAnimalandPlantScience，ChineseAcademyofAgriculturalSciences。 Jilin132109，China；2．JilinZhongteB幻fPc 0Dg Limited—liabilityCompany，Jilin132109，China) Abstract：FemaleBAIB／cmiceoffourtosixweek—oldfemalewereimmunizedwiththepurifiedmink enteritisvirus(MEVSMPV一11)strain．spleencellsweretakentofusewithSP2／omyelomacellsandhybri— domacellswereclonedbyusingindirectELISA andlimiteddilutionmethods．8hybridomacelllinessteadi— lysecretingmonoclona1antibodies(McAbs)againstMEV wereobtainedanddesignatedasD3，H5，F5，F4， A9，B7，H 11andH8，respectively．TheELISA titersoftheseMcAbsrangedfrom 1：6．4×10。to 1：2．56 ×10 ．SpecificitytestshowedthatalltheMcAbswerespecifictoMEV，canineparvovirusandfelinepan— leukopeniavirus，butdidnotreactwith caninedistempervirus，A leutian diseasevirusand canineadenovi— rus．AlltheM eAbswereidentifiedtobeIgG usingMouseMabIsotypingTestKit． Keywords：minkenteritisvirus；monoclonalantibody；biologicalcharacteristic