低分子量岩藻聚糖酶法制备工艺.pdfVIP

第 30 卷 第 4 期 农 业 工 程 学 报 Vol.30 No.4 2014 年 2 月 Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering Feb. 2014 279 低分子量岩藻聚糖酶法制备工艺 ※ 闫相勇，刘翼翔，凌绍梅，李 斌，吴永沛 （集美大学生物工程学院，厦门 361021 ） 摘 要：为了获得分子量集中，生物活性显著的岩藻低聚糖片断，该试验从九孔鲍肝胰腺中分离纯化出岩藻聚糖 裂解酶裂解岩藻聚糖。通过等电点法、硫酸铵分布盐析法及 Sephadex G-150 柱分离纯化出 2 种底物酶（岩藻聚糖 酶、α-L-岩藻糖苷酶），同时采用黏度和还原糖法作为酶活的评价指标评价酶的作用特点。结果表明：等电点法中 pH 值 4.5 、5.0 时的沉淀物酶活最高，且pH 值 4.5 的沉淀物在硫酸铵质量分数为 30%时分离纯化出岩藻聚糖酶， 而 pH 值 5.0 的沉淀物在硫酸铵质量分数 40% 时分离纯化出 α-L-岩藻糖苷酶。此种工艺方法能得到 2 种岩藻聚糖 裂解酶，底物降解率为 8%～15%，获得硫酸基团破坏性小的低分子量岩藻聚糖。因此，九孔鲍岩藻聚糖裂解酶可 作为酶法制备低分子量岩藻聚糖的工具酶，具有重要的开发应用价值。 关键词：酶；纯化；工艺；九孔鲍；岩藻聚糖裂解酶；岩藻聚糖 doi ：10.3969/j.issn.1002-6819.2014.04.034 中图分类号：TS201.2 文献标志码：A 文章编号：1002-6819 2014 -04-0279-07 闫相勇，刘翼翔，凌绍梅，等. 低分子量岩藻聚糖酶法制备工艺 [J]. 农业工程学报，2014，30 4 ：279－285. Yan Xiangyong, Liu Yixiang, Ling Shaomei, et al. Preparation technology of low molecular weight fucoidan by enzyme hydrolytic from Laminaria japonica [J]. Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering Transactions of the CSAE , 2014, 30 4 : 279 －285. in Chinese with English abstract [4] 方式、糖基连接顺序等各不相同 ，由此决定了岩藻 0 引 言 [5] [6] 聚糖具有多种生物活性，如抗炎 ，抗病毒 ，抗凝 九孔鲍（Haliotis diversicolor supertexta ）为热 [7] [8] [9] 血 ，抗肿瘤 等，而且证实口服给药无毒副作用 ， 带、亚热带重要经济鲍种，是中国福建、台湾及广 并且这些生物活性是陆生植物硫酸多糖类化合物 东省海域主要的人工养殖种类之一，年人工养殖产 所无法比拟的。天然岩藻聚糖（来源于 Laminaria