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Ｒesearch Paper 研究报告
微生物学报 A cta M icrobiolog ica Sinica
54 (5 ):525 － 53 1 ;4 May 20 14
ISSN 000 1 － 6209 ;CN 11 － 1995 / Q
http :/ / journals． im ． ac ． cn / actamicrocn
doi :10. 13343 / j ． cnki． wsxb ． 20 14 . 05. 007
AphA 蛋白促进副溶血弧菌c-di-GMP 合成和生物膜形成
1 ，2 2 2 ，3 2 2 3 2 * 1 *
， ， ， ， ， ， ，
黄倩 张义全 胡小许 王丽 杨瑞馥 钟青萍 周冬生 黎晓敏
1 ， 4007 15
西南大学动物科技学院 重庆
2 ， ， 10007 1
军事医学科学院微生物流行病研究所 病原微生物生物安全国家重点实验室 北京
3 ， 5 10642
华南农业大学食品学院 广东广州
:【 】 AphA 。【 】
摘要 目的 综合运用表型和分子生化实验研究 蛋白对副溶血弧菌生物膜形成的调节机制 方法
ap hA (ap hA ) (WT ) ;
利用菌落褶皱和结晶紫染色实验比较 突变株 Δ 和野生株 的表型差异 进而利用色谱串联
(HPLC-MS / MS) ap hA WT c-di-GMP ; ap hA WT ＲNA ，
质谱 的方法分别检测Δ 和 中 分子含量 提取Δ 和 的总 采
ＲT -PCＲ AphA scrAB C scrG ; scrAB C scrG
用实时定量 的方法研究 对 和 的调控关系 分别构建克隆有 和 上游启
LacZ ， ap hA WT ， -
动子区的 重组质粒 并将重组质粒转入Δ 和 中 通过测定并比较两株菌中 β 半乳糖苷酶活性
差异来进一步研究AphA 对scrAB C 和scrG 的调控关系;PCＲ 扩增scrAB C 和scrG 的整个启动子区DNA 序列，
His-AphA ， (EMSA ) AphA 。
并纯化 蛋白 通过凝胶阻滞实验 验证 对靶基因启动子区是否具有直接的相互作用
【 】 AphA c-di-GMP ; ＲT -PCＲ LacZ
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