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第六章 色谱分析导论 6.1 色谱法及其分类 6.2 色谱曲线和术语 6.3 色谱分析基本原理 第六章 色谱分析导论6.1色谱法及其分类 一、色谱发展的历史 第六章 色谱分析导论6.1色谱法及其分类 二、 分类 1. 按两相状态 2. 按分离原理 3. 按固定相形式 4. 按固定相材料 第六章 色谱分析导论6.2 色谱曲线和术语 一、色谱曲线 第六章 色谱分析导论6.2 色谱曲线和术语 二、术语 基线 死时间 保留时间、调整保留时间 峰高、半峰宽、峰底宽、峰面积 标准偏差 第六章 色谱分析导论6.2 色谱曲线和术语 三、色谱曲线的应用 组分定性 组分定量 评价柱效 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 一、分配过程 1. 分配系数KD 2. 分配比 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 二、保留值 1.保留时间、调整保留时间 2.保留体积、调整保留体积 3.基本保留方程 4.相对保留值 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 三、塔板理论 基本假设 1.色谱柱如同蒸馏塔一样可以分为一个一塔板 流动相以一个塔板体积的形式不连续注入 组分在每一个塔板上得到分配平衡，且平衡常数不变。 组分在塔板之间无分子扩散。 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 塔板理论（KD=1) 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 塔板理论 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 塔板理论 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 塔板理论 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 塔板理论 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 塔板理论 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 塔板理论 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 塔板理论 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 塔板理论 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 塔板理论 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 塔板理论的成功之处: 1.引入了理论塔板数和理论塔板高度的两个概念。 2.成功地解释了理想色谱流出曲线呈正态分布。 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 塔板理论的缺陷 相邻塔板之间由于组分浓度不同，存在浓度梯度，导致纵向分子扩散。 组分通过扩散从流动相进入固定相，再从固定相回到流动相进行分配，这个过程需要时间，所以分配平衡并不是总能达到的。 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 四、速率理论（Van Deemter, Giddings) 考虑在实际的色谱过程中存在的四种展宽因素: 涡流扩散 纵向分子扩散 流动相传质 固定相传质 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 四、速率理论（Van Deemter, Giddings) 速率理论沿用了塔板理论的概念，但不单把色谱峰展宽看成是由于组分在流动相和固定相分配，还把组分在两相中的扩散和传质联系了起来，认为代表色谱峰正态分布曲线中的标准偏差?受到以上四种动力学因素的控制。 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 ?2是方差，方差具有加和性，四种过程引起峰展宽的和为： 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 塔板高度为单位柱长的谱带展宽程度: 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 四、速率理论（Van Deemter, Giddings） Van Deemter 方程（范氏方程） Van Deemter 方程的性质和意义 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 五、影响谱带展宽的其他因素 （速率理论没有考虑） 非线性色谱 活性中心的影响 柱外效应 第六章 色谱分析导论6.3 色谱分析基本原理 六、基本分离方程 分离度 影响分离度的因素 基本分离方程 * * 石油醚(流动相) 碳酸钙(固定相) 样品 石油醚(流动相) 碳酸钙(固定相) 样品 1906年，俄国植物学家M.Tswett实验：分离对象是植物绿叶的色素提取液。标志着色谱学(Chromatography)的诞生 tR to tR’ h h W1/2 0.607h 2? Wb 时间 信号 1/2 1/2 1/4 1/4 1/4 1/4