人脐带间．充质干细胞最适宜培养条件研究.pdfVIP

学 术 探 讨 中 国 民 族 民 间 医 药 Academicstudy Chinesejoumalofethnomedicineandethnopharmacy ·31· 人脐带间．充质干细胞最适宜培养条件研究 张玉琳 于纪棉 曾 斌 王静文 倪晶晶 浙江省宁波卫生职业技术学院，浙江 宁波 315104 【摘 要】 目的：探讨人脐带间充质干细胞 (UCMSCs)成功培养扩增的条件 ，以提高其培养的成功率。方法：无菌条件下采集足月 胎儿脐带6份，分离培养UCMSCs，观察比较不同的新鲜程度、不同分离方法在相同的培养条件下对UCMSCs培养的影响，并对优化条件下 培养的UCMSCs进行扩增，评估其贴壁细胞形成集落数。对培养得到的细胞进行表面抗原标志检测及其鉴定。结果：从足月胎儿新鲜脐带 中采用组织块贴壁的方法，在 5％血清浓度的IMDM培养基中，分离培养得到的UCMSCs成功机率最高，且生成集落数最多为 (5．3± 0．28) ×10／0．5cm脐带组织，与双酶法比较存在明显差异 (P0．001)；而胶原酶法接种后未见明显贴壁细胞。培养得到的UCMSCs细胞 表面表达MSCs相关抗原CD29，但不表达造血细胞相关抗原CD34，表明此种 自脐带中分离得到并诱导扩增的成纤维样细胞为间充质干细 胞。结论：优化UCMSCs的培养条件，成功地建立稳定的培养方法，可提高UCMSCs培养成功率，为UCMSCs的实验研究和l床应用打下 基础。 【关键词】 脐带间充质干细胞；培养条件 【中图分类号】R329．2 【文献标识码】A 【文章编号】1007—8517(2013)11—0031—03 Discussiononthebestcultureconditionsofhumanumbilicalcordmesenchymalstem cells ZHANGYu—Lin，YUJI—Mian，ZENGBin，WANGJing—Wen，NIJing—Jing DepartmentofHumna Morphp10gy，NingboCollegeofHealthSience，Ningbo315104 Abstract：0bjective：Tooptimizethecultureconditionsofhumanumbilicalmesenchymalstemcells(UCMSC8)，andimprove thecultureachievementratio．Methods：Umbilicalcordwerecollectedfrom fuUterm deliveries，mesenchyrmalstem cells(MSCs) wereisolatedrfom theumbilicalcord．Theinfluencesofdifferentdgreesoffreshness．separationmethodsinthesameconditionson UCMSCswereoberved．andofllowedbycountedcolonynumbers．UCMSCswereisolatedrfom umbilicalcord ．thepurityofMSCswas analyzedbyICC．Results：Whentheotherconditionswerethesalne，freshumbilical cordfrom full—temr deliveries。methodoftiling thetissue．intheIMDM+5％FCSmudium hadthebestresults．An0．5cmumbilicalcordtissuescontained (5．3±0．28) ×10’ad． hesivecellswereharvestedattheprima~ culture．Thecellsyieldsanddoublingtimesinexplantationtechniquegroupwerehi erthan thoseinenzymescombinationdigestiongroup (P0．001)．Whiletherewasnoad