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中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2011, 33(11): 1290– 1294 http ://www.cj
牛精子和卵母细胞低温保存研究进展
周 正 张绍志 陈光明∗
( , 310027)
浙江大学制冷与低温研究所 杭州
摘要 牛的精子和卵母细胞的低温保存对于畜牧业的发展有重要价值。该文综述了近年来
牛精子和卵母细胞低温保存的研究进展, 包括保存方法、与低温保存有关的细胞特性、存在的问
题和改进的方法等内容。
; ; ;
关键词 低温保存 牛 精子 卵母细胞
畜禽既是一种珍贵的自然资源, 又是畜牧业发 及牛的冷冻精液保存技术; 欧美一些发达国家还成
展的基础和保证。建立牛品种资源保护体系, 对牛 立了精液供应公司, 开展国际精液贸易业务[4] 。
品种资源进行有效的选育、开发、利用和推广, 是 目前, 我国牛精液的冷冻保存技术已形成一套
我国畜牧业向高效、优质、可持续发展转变的重要 规范化的工艺流程, 并且已经制订和实施了牛冷冻
途径[1] 。 精液生产的国家标准。在盛装容器方面, 我国在90
目前, 牛的人工授精技术在我国已经得到了广 年代后已全面实现由颗粒型冻精向细管型冻精生产
泛的应用, 而利用液氮将精液长期冷冻保存是人工 的转变[5] 。在冷冻方法方面, 目前采用较多的是气
授精技术的一项重大革新, 其重要性不言而喻。自 氮熏蒸法, 即将冻精放在液氮液面上方。对于安瓿、
1958年我国首次成功地进行了家畜的精液冷冻保存 细管装精液, 国内采用较多的设备是大口径液氮罐;
研究以来, 经过半个多世纪的发展, 家畜中奶牛现已 冷冻槽因冷冻效果差, 液氮耗量大, 已基本被淘汰;
基本全部实现人工授精; 在肉牛生产方面, 人工授精 喷液氮式的程控降温仪因价格昂贵、液氮消耗量也
技术也得到较好的推广和应用。此外, 牛卵母细胞 较大, 也不常采用。邓福金等[6]报道过一种细管冻精
的低温保存也取得了一定程度的进展。这些对我国 新方法即密集浸入法, 该法可极大地提高每批次的
畜牧业的发展均有着重大的意义, 不仅提高了母牛 冻精数量, 减少液氮消耗量, 同时保证了质量, 从而
的受胎率, 使得优良品种得到保留, 还能预防疾病的 优化了冻精生产工艺。除了上述传统的低温冷冻保
传染, 免除了良种牛群之间配种的地域限制, 保护了 存方法, 近年来将冷冻干燥技术应用于哺乳动物细
遗传资源[2] 。 胞保存是生物材料保存领域的研究热点之一, 其中
本文将主要介绍近年来国内外牛生殖细胞低 就包括具有显著经济价值的牛精子。与低温保存方
温保存的研究进展, 包括具体保存方案、细胞与低 法相比, 冻干保存具有成本低廉、操作方便、占地
温保存有关的特性的测量、存在的问题和改进的方 面积少、便于运输和存储等优 [7]
点 。
法等内容。 传统上, 甘油、二甲基亚砜是最为常见的低温
冷冻保护剂(cryoprotective agent, CPA), 可以减少精
1 牛精子细胞的低温保存 子在冷冻和解冻时受
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