基因、信号调控异常与再生障碍性贫血的发病及治疗.DOCVIP

临床医学论文-基因、信号调控异常与再生障碍性贫血的发病及治疗 【关键词】? 再生障碍性贫血；基因；信号调控 ??? 再生障碍性贫血（AA）是一组由多种原因，通过不同机制引起的异质性疾病，最终均存在骨髓造血干/祖细胞缺乏。造成造血细胞减少的机制比较复杂，临床和实验数据均支持免疫异常在AA发病中的作用，但其具体的发病机理尚不清楚。本文就近年基因、信号调控异常与再生障碍性贫血造血细胞凋亡增加及其发病方面的研究及治疗进展作一简述。 ??? 1??? 发病机理 ??? 1.1?? 造血细胞凋亡增加?? AA患者骨髓细胞凋亡增加已被不少研究所证实。Callera等用原位缺口末端标记法（TUNEL）检测了11例AA（含重型AA4例）的骨髓活检标本，发现其骨髓细胞凋亡率（8.19%±1.45%）明显高于正常对照组（2.07%±0.86%）[1]。同一学者还发现AA骨髓和外周血淋巴细胞对抗Fas抗体诱导的凋亡敏感性增加，而在恢复期AA患者、正常人及多次输血的非AA患者未发现这种现象，提示凋亡增加不仅发生于造血前体细胞，而且是一个从造血前体细胞到成熟血细胞的连续性事件。Philpott等采用7-AAD（7-氨基放线菌素D）和抗CD34抗体双标法在流式细胞仪上检测了46例AA患者（含重型AA12例）骨髓CD34+细胞的凋亡率，发现：（1）AA患者骨髓CD34+细胞的凋亡率（33.44%±9.26%）明显高于对照组（7.86%±0.79%）；（2）骨髓中CD34+细胞绝对值最少的患者，其CD34+细胞的凋亡率最高；（3）骨髓CD34+细胞的凋亡率与患者输血依赖性相关。因而认为AA患者骨髓造血干细胞缺乏是由于过度凋亡所致[2]。我们研究发现，将23例AA患者（含重型AA10例）血清同正常人骨髓CD34+细胞共同孵育后，能促使正常人CD34+细胞凋亡，重型AA组血清诱导的CD34+细胞凋亡率明显高于非重型AA组和正常对照组，非重型AA组血清诱导CD34+细胞凋亡率高于对照组，且CD34+细胞凋亡率与AA患者的外周血白细胞数呈负相关。也进一步提示凋亡加速是AA患者造血干/祖细胞缺乏的重要原因[3]。 ??? 1.2?? 凋亡相关基因及激酶的异常?? ??? 1.2.1?? Fas/FasL系统?? Fas基因编码的Fas(Apo-1/CD95)是一种分子量为45 kD的Ⅰ类跨膜蛋白，属于肿瘤坏死因子受体（TNFR）或神经生长因子（NGFR）受体超家族成员。Fas配体（FasL）是一种分子量为40 kD，属于TNF家族成员的Ⅱ类膜蛋白。已知Fas和其配体或抗Fas单克隆抗体之间可以发生交联，介导细胞凋亡信号，构成一条重要的细胞凋亡诱导途径。有关Fas/FasL系统参与AA造血细胞凋亡增加机制的研究已有不少报道。Maciejewski等采用免疫荧光双标法检测了41例AA患者及40例正常志愿者骨髓中CD34+细胞膜上Fas抗原（CD95）的表达情况，结果发现AA患者骨髓CD34+细胞膜上Fas抗原表达量比正常人明显增高，恢复期的AA患者骨髓CD34+细胞膜上Fas抗原表达量有所下降，但仍高于正常对照组，同时发现Fas抗原的表达量同由抗Fas抗体诱导的集落形成抑制活性有相关性，因此推断Fas/FasL系统参与了AA骨髓造血功能障碍的病理生理过程[4]。Callera 等还发现重型AA患者淋巴细胞Fas抗原表达量也高于对照组。提示Fas/FasL系统不仅参与了AA造血干/祖细胞的凋亡，而且还可能介导了AA患者成熟淋巴细胞的凋亡。我们研究发现AA患者血清可诱导CD34+细胞表达Fas抗原，且AA患者血清诱导的凋亡细胞数与AA患者血清诱导的CD34+细胞表面的Fas抗原表达呈正相关，提示AA血清诱导正常骨髓CD34+细胞凋亡增加也与 Fas/FasL系统有关[3]。 ??? 1.2.2?? Bcl-2基因及相关基因?? Bcl-2（B-cell lymphoma/leukemia-2)蛋白大家族是调节细胞凋亡的关键元件， 该家族成员中主要包括了Bcl-2、Bcl-XL、Mcl-1、CED-9等凋亡抑制基因和Bcl-XS、Bax、Bad、Bak等凋亡促进基因，家族成员之间可相互影响，或与其它凋亡调控基因（如P53、c-MYC等）相互影响，共同组成一个复杂的凋亡调控系统。有关Bcl-2及相关基因在AA造血细胞凋亡增加的病理过程中的作用尚有争论。Callera等研究认为，由Fas介导的AA患者骨髓及外周血T、B淋巴细胞的凋亡没有Bcl-2的参与，原因是Fas介导的骨髓CD34+细胞凋亡绕开了Bcl-2及Bcl-X的抗凋亡效应[5]。而张圣明等却发现AA患者骨髓CD34+细胞Bcl-2蛋白的表达量明显低于正常人，作者认为某些致病因子引起造血干/祖细胞的抑凋亡基因表达减少，致使