急性白血病原代细胞TGF-βⅡ型受体同种型的发现及其临床意义.DOCVIP

临床医学论文-急性白血病原代细胞TGF-βⅡ型受体同种型的发现及其临床意义 ??????? 作者：陈萍，陈元仲，吴勇，黄慧芳，李乃农 【摘要】? 转化生长因子β（TGF-β）及其受体的基因突变已被证实在肿瘤形成中具有重要的作用，在许多肿瘤中都发现有TGF-βⅡ型受体（TβR-Ⅱ）表达异常或表达缺失。为了了解急性白血病患者TβR-Ⅱ基因是否存在异常，本研究应用大范围RT-PCR的方法分段扩增急性白血病原代细胞TβR-Ⅱ的编码序列，并结合序列测定技术，分别对6例急性白血病患者以及11例正常人TβR-Ⅱ的编码序列进行突变检测。全部患者经骨髓细胞形态检查符合FAB诊断标准且骨髓原始细胞≥90%。肝素抗凝骨髓4-5 ml，分离单个核细胞，用TRIZOL试剂提取总RNA，反转录后行PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物。回收目的片段，克隆到PGEM-T载体，进行序列的测定。结果显示：在检测的病人中有2例病人中存在TβR-Ⅱ的同种型，而此2例病人临床预后不良。结论：部分白血病病人存在TβR-Ⅱ的同种型，而且该同种型可能与预后有关。 【关键词】? 急性白血病 　　Identification of the Isoform in Type Ⅱ Receptor of Transforming Growth Factor-beta in Patients with Acute Leukemia and Its Clinical SignificanceAbstract??? Recent research indicates that TGF-β and type Ⅱ receptor (TβR-Ⅱ) play an important role in the pathogenesis of tumor. A high frequency of abnormalities in TβR-Ⅱ has been demonstrated in various cancers.To identify the mutation of TβR-Ⅱ in patients with acute leukemia，the bone marrow samples from 6 patients with acute leukemia and 11 normal individuals as control were detected by long-range RT-PCR.To detect a deletion in sequence of the TβR-Ⅱgene，the PCR products were cloned to T vector and then sequenced.The results showed that there was existance of? the isoform of TβR-Ⅱ in 2 cases out of 6 patients with acute leukemia.These two patients had more poor prognosis than others.In conclusion，there was the isoform of TβR-Ⅱ in partial patients with acute leukemia，and the isoform may be related with prognosis. 　　Key words? acute leukemia;? TβR-Ⅱ;? isoform? receptor 　　TGF-β信号转导通路在调节多种细胞的增殖与分化、诱导细胞凋亡等方面具有重要的作用，有研究表明这一通路的紊乱可以导致多种肿瘤的发生［1］ 。TGF-β受体（TβR）有3种亚型即TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ和TβR-Ⅲ，其中TβR-Ⅱ和TGF-β具有较高的亲和力，在TGF-β介导的信号转导中起着重要的作用，在许多肿瘤如慢性淋巴细胞白血病、人类表皮T细胞淋巴瘤患者中［2-3］均观察到TβR-Ⅱ表达缺陷。目前对于急性白血病原代细胞是否存在TβR-Ⅱ缺陷未见报道。本研究通过应用大范围RT-PCR技术分段扩增急性白血病原代细胞 TβR-Ⅱ的编码序列，进行序列的测定，结合收集的病人的临床资料，初步探讨TGF-βⅡ型受体（TβR-Ⅱ）在急性白血病发病机制中所起的作用。 　　材料和方法 　　研究对象 　　实验组6例，男5例，女1例，平均年龄47±18.6岁（30-66岁），为2003年4月-2004年2月福建医科大学附属协和医院血液科住院或门诊白血病病人，均为初治患者，其中急性淋巴细胞白血病2例（均为L2），急性非淋巴细胞白血病4例（M1? 2例，M2? 1例，M5? 1例）按F