2型糖尿病大鼠脂联素受体mRNA表达及其与糖脂代谢关系研究.pdfVIP

2型糖尿病大鼠脂联素受体mRNA表达及其与糖脂 代谢关系的研究 中文摘要 目的 造一种符合人类T2DM发病特点的动物模型，并采用逆转录聚合酶链反应 (reverse chainreaction，RT-PC刚的方法检测实验组大 transcriptionpolymerase 2) 鼠骨骼肌组织脂联素受体1(AdipoR1)和肝脏组织脂联素受体2(AdipoR mRNA表达水平，同时检测大鼠血脂、血糖、胰岛素、脂联素等糖、脂代谢相 mRNA表达的 关指标，然后进行综合分析，旨在探讨T2DM状态下影响AdipoR 因素及其与胰岛素抵抗(insulin 与IR相互作用的可能机理，进而了解其与T2DM发病的关系。 方法 健康清洁级近交系SD雄性大鼠20只，体重200～2509，按完全随机法分 常饲料喂养组，DM组为高脂饲料喂养12周后再给予小剂量STZ(25 mg／kg)一 次性腹腔注射建立T2DM动物模型。大鼠在适应性喂养1周后，用相应的饲料 喂养至第12周末，眶静脉取血留取血清标本检测甘油三酯(TG)、胆固醇(1℃)、 12h后，DM组大鼠一次性腹腔注射无菌STZ(25 mg／kg，溶于pH=4．4、O．1M无 菌柠檬酸．柠檬酸钠缓冲液)造模，NC组腹腔注射相应体积的上述柠檬酸一柠檬 酸钠缓冲液。第14周末进行口服葡萄糖刷量试验(Oral OGTT)筛选T2DM大鼠。两组大鼠继续相应饲料喂养，至第25周末处死所有 大鼠，心脏取向留取血清标本，分离肝右叶和右后肢股四头肌组织，用RT-PCR 2mRNA表达水平。试 方法检测骨骼肌组织AdipoR]mRNA和肝脏组织AdipoR 验期问监测大鼠体重，观察大鼠进食、饮水、排尿和活动情况。 结果 1．试验第12周时DM组血清TG、FINS和LDL—c水平已显著升高，APN 和HDL．c低于NC组，差异具有统计学意义(尸0．05)。FBG和TC水平 在两组中无显著性差别(P0．05)。同时根据所测FBG和FINS水平计算 胰岛素敏感性指数(1SI)评价胰岛紊抵抗程度，即可发现高脂喂养的SD 大鼠其1S1水平显著低于正常饲料喂养的大鼠，差异具有统计学意义 (PO．05)。 2模型组大鼠经高脂饲料喂养加小剂量STZ一次性腹腔注射后血糖升高， 用OGTW检测0h，0．5h，1h，2h四个时点血糖，达到大鼠糖尿病诊断标 准，目．血糖至实验结束前始终维持在高水平。NC组大鼠四个时点血糖值 均未达到大鼠糖尿病渗断标准。 3造模前两组大鼠体重均显著增加，但模型组大鼠体重增加更明显，与NC 组比较差异有统计学意义(P0．05)。造模后，模型组体重逐渐减轻，并 出现明鼎的多饮、多尿和多食。至试验结束时，DM组血中FBG、TG、 继续降低并低于NC组，差异具有统计学意义(PO．05)。DM组ISl显 著低于NC组，差异具有统计学意义(尸0．05)。血中TC的升高与TG 不同步。 4．骨髂肌和肝脏组织中AdipoR的RT．PCR结果显示，DM组骨骼肌AdipoR 2mRNA低于 lmRNA的水平显著低于NC组，DM组肝脏组织AdipoR NC组，差异有统计学意义(JP0．05)。 5 2mRNA的表达水平呈ill(I11关，并且各自与 AdipoRlmRNA和AdipoR 结论 1 通过高脂喂养结合小剂量STZ一次性腹腔注射能够在没有糖尿病遗传背