大黄素抑制体外淋巴细胞增殖的作用研究.DOCVIP

临床医学论文-大黄素抑制体外淋巴细胞增殖的作用研究 【关键词】? 淋巴细胞；细胞增殖；大黄素；免疫耐受 　　Inhibitory effects of emodin on proliferation of human lymphocytes in vitro 　　【Abstract】 AIM: To evaluate the inhibitory effects of emodin on proliferation of human lymphocytes in vitro and to explore its possible mechanism. METHODS: Human peripheral blood lymphocytes isolated from healthy donors were cultured with phytohemagglutinin (PHA), interleukin2 (IL2) or mixed leukocyte culture (MLC),?respectively. Interfered by different agents, emodin and CsA, the proliferation of human lymphocytes was?observed by MTT. RESULTS: In the range of concentrations from 3?0-6 mol/L to 3?0-5 mol/L, emodin could suppress the proliferation of lymphocytes induced by PHA, IL2 or MLC obviously, and showed a positive concentrationdependent inhibitory effect. And also emodin had a synergistic effect with CsA? in? immunosuppressive behavior. CONCLUSION: Emodin exerts its immunosuppressive effects through inhibiting the proliferation of lymphocytes in vitro. 　　【Keywords】 lymphocytes; cell proliferation; emodin; immune tolerance 　　【摘要】 目的：研究大黄素的体外免疫抑制作用，探讨其可能的作用机制. 方法：通过PHA，IL2及MLC活化淋巴细胞，给予大黄素和CsA干预，采用MTT法观察比较大黄素和CsA对淋巴细胞活化的抑制作用. 结果：在3×10-6～3×10-5 mol/L的浓度范围内，大黄素对PHA，IL2及MLC引起的淋巴细胞活化表现出明显的抑制作用，其作用随浓度增加而增强，并与CsA具有协同性. 结论：大黄素在体外通过抑制淋巴细胞增殖来发挥其免疫抑制作用. 　　【关键词】 淋巴细胞；细胞增殖；大黄素；免疫耐受 　　0引言 　　大黄素（emodin）属蒽醌类，是蓼科植物提取的主要成分. 具有抗肿瘤、抗炎抑菌及保护肝肾等作用［1-3］. 我们观察emodin对离体淋巴细胞活化的影响，并与环孢素A（CsA）比较，研究两者的协同性，以探讨emodin在移植免疫抑制中的作用. 　　1材料和方法 　　1.1材料emodin（标准品）由陕西省药品检验所提供；CsA由Novartis公司提供；淋巴细胞分离液、四甲基偶氮唑盐（MTT），重组人IL2均购自晶美公司；新生牛血清由杭州四季青生物工程研究所提供；RPMI 1640，植物血凝素（PHA）分别购自Gibco公司和上海市医学化验所. 　　1.2方法实验分为正常对照组、 CsA组（1 mg/L）， emodin大（3×10-5mol/L），中（1×10-5 mol/L），小剂量组（3×10-6 mol/L），CsA与emodin联用组（1mg/L CsA ＋1×10-5 mol/L emodin）. 外周血淋巴细胞（PBMC）取自健康成年人静脉血，细胞密度为1×109/L，按200 μL/孔培养于96孔培养板中，每组设6个复孔，同时设2个复孔对照（不加细胞，其他同实验孔），置入37℃ CO2的孵育箱中培养. ①PHA与IL2刺激组： 分别将PHA溶液按1∶50的比例、IL2贮存液按1∶40的比例加入淋巴细胞悬液中，分组给药后培养. ②MLC组：采用双向混合淋巴细胞培养，取两位健康成年人无菌外周静脉血，分别制备外周血淋巴细胞（方法同前）. 将供者、受者淋巴细胞每孔分别加入各100 μL，分组给药后