核酸等温扩增技术的定义及特点.pptVIP

核酸等温扩增技术是一类分子生物学技术的总称，它们能在某一特定的温度下扩增特定的DNA或者RNA。 与PCR技术相比核酸等温扩增对仪器的要求大大简化，反应时间大大缩短，更能满足快速简便的需求。 核酸等温扩增技术的定义及特点 环介导等温扩增技术（LAMP） 依赖于核酸序列的扩增技术（NASBA） 滚环扩增技术（RCA） 单引物等温扩增技术（SPIA） 依赖于解旋酶的等温扩增技术（HAD） 链替代扩增技术（SDA） 快速等温检测放大技术（RIDA） 切刻内切酶核酸恒温扩增技术（NEMA） 核酸等温扩增技术的分类 环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）是2000年日本研究人员Notomi等发明的一种新型体外等温扩增特异性核酸片段的技术。 该技术主要利用两对特殊设计的引物和具有链置换活性的DNA聚合酶，使反应中在模板两端引物结合处循环出现环状单链结构，从而保证引物可以在等温条件下顺利与模板结合，并进行链置换扩增反应。 环介导等温扩增技术（LAMP） LAMP克服了传统PCR反应需要通过反复热变性获得单链模板的缺点，避免了反复升降温的过程，实现了恒温条件下的连续快速扩增，具有更高的灵敏度和扩增效率。 15-60min内可扩增出109-1010倍靶序列拷贝，得到500ug/ml的目的DNA。具有简单、快速、特异性强的特点。