糖尿病大鼠肝细胞、毛细胆管超微结构改变及PPARgamma激动剂对其影响研究.pdf

浙江人学颂f，学位论叟 糖尿病大鼠肝细胞、毛细胆管超微结构的改变及 PPARgamma激动剂对其影响的研究 浙江大学医学院 外科学(肝胆) 01级硕士研究生 匡琳 导师 蔡秀军 教授 中文摘要 糖尿病在人群中的高发病率已日渐成为全球的公共性问题。同时，与之相关 的肝胆系统疾病也同渐增多，使褥外科临床面临新的挑战。本研究希望建立耱尿 病性肝脏病变模型，了解糖尿病大鼠肝细胞、毛细胆管超微结构改变，然后用 PPARgamma激动剂一罗格列酮治疗后与对照组进行比较，得出一些结果，为临床 治疗和预防糖尿病相关性肝艟疾病提供实验依据。 材料与方法： ～、建立糖尿病肝脏病变模型： (1)对照组(雄性、雌性各5只)：单次腹腔注射0．1MpH4．5枸橼酸钠缓冲 液。 (2)普通糖尿病组(雄性、雌性各5只)、糖尿痛亚组(雌性5只)、糖尿病 重症组(雄性5只)：单次腹腔注射含STZ剂量分别为60mg／kg、50mg／kg、 ]00mg／kg的0．1MpH4．5枸橼酸钠液。 pH4．5枸橼酸钠液。第三天起灌胃罗格列酮lmg／Kg／d。 2．每天测尿糖，若尿糖≥+“+，则皮下注射精蛋白锌胰岛素1～3单位／天。重症 浙江人学硪Ij学位论史 组不注射精蛋白锌胰岛素。模型建立10周后，抽取腔静脉血测定血糖，同时处 死后留取肝脏组织标本。 二、透射电镜样本的制备： 1．组织固定，冲洗，染色，脱水。 2．包埋。 3．切片(半薄切片、修块和超薄切片)。 4．捞片。 5．超薄切片染色。 6．荷兰菲利浦TECNAIO透射电镜观察。 结果： 一．大鼠体重：到10周止，糖尿病组和对照组相比，体重有明显下降：罗格列酮组 和普通糖尿病组相比体重略有增加。 二．大鼠血糖：到10周止，雄、雌性糖尿病组大鼠血糖均明显比对照组高，且雄 性组改变更为显著；糖尿病亚组血糖与对照组相比无显著差异；雄、雌性糖尿病 大鼠用罗格列酮治疗后血糖均无明显下降，甚至有增高趋势。 三。大鼠肝脏超微结构： (1)正常大鼠肝脏细胞细胞结构清晰，胞质丰富，内含发达而丰富的各种细胞器。 线粒体数量多，包膜清晰完整，嵴清晰可见并呈平行排列。内质网成群分布于胞 质内，排列有序整齐。核大两圆，核膜完整清楚，核仁致密。毛细胆管未见扩张。 (2)普通糖尿病大鼠肝脏细胞结构模糊。线粒体肿胀、模糊或变小，部分相互融 合，嵴显示不清。内质网断裂、脱粒，排列紊乱。核淡染，核仁较松散。可见脂 肪交性。毛细胆管明显扩张，管壁结构不清，管腔内隐约可见无定型物。 (3)糖尿病赃组大鼠肝脏细胞超微结构病变程度介于J下常组与普通糖尿病组之 间。线粒体略模糊，内质网排列尚有序，断裂少。细胞质内空泡较多。毛细胆管 稍有扩张。 (4)重症糖尿病大鼠肝脏细胞超微结构与普通糖尿病组相比肝细胞结构破坏更明 显，线粒体及内质网崩解、消失，亚细胞器结构破坏致细胞内大量坏死组织断片 浙江人学倾I。学位论艾 残留，细胞核固缩。 (5)糖尿病罗格列酮治疗组大鼠肝脏细胞结构较糖尿病组清晰。大部分线粒体膜 完整清楚，基质较深暗。内质网排列整齐有序，断片不明显。毛细胆管无明显扩 张。 结论： (i)STZ诱导的糖尿病大鼠肝细胞、毛细胆管在超微结构上有明显的改变，且这 种改变的严重程度与血糖水平呈正相关。 (2)一旦大鼠形成糖尿病，尽管血糖以后一直接近正常，但糖尿病的并发症仍存 在，肝细胞的破坏仍可见，但病变程度比血糖高的糖屎病大鼠要轻。 (3)罗格列酮对糖尿病大鼠的肝细胞、毛细胆管结构有保护作用。 关键词：糖尿病肝细胞毛细胆管超微结构罗格列酮 浙江人学硕I‘学位论立 THE CHANGES OF