鸡马立克氏病病毒蚀斑快速检测方法研究.pdfVIP

摘要 鸡马立克氏病(Marek’Sdisease肋)是由疱疹病毒引起的一种淋巴组织增生性疾病。该病广 泛流行是严重危害家禽的传染病之一，目前活疫苗免疫仍是预防该病的主要手段。疫苗的效价和 免疫效果，是成功的预防该病发生的关键，马立克氏病疫苗的配制和检测国内和国外都采用病毒 蚀斑数目作为疫苗效价的主要指标，如进行疫苗蚀斑的测定，已有检测方法需要4-6天时间，所 以在疫苗分装之前无法确定所收获毒液中的蚀斑数以及进行疫苗的配制。这样就使得在MD疫苗， 尤其是多价疫苗生产中，在疫苗配制环节上存在着很大的盲目性，同样在疫苗的使用过程中，疫 苗的毒价时常会发生变化，特别需要对疫苗的效价进行检测，传统方法需时长的特点是远远不能 满足快速检测的要求。因此建立快速的病毒蚀斑检测方法是非常必要的。 MDVl：Yi=O．1061Xi—11．38：MDV2：Yi=0．1158Xi+O．5867 其中，YiPFU／mlXi=FAC+／ml。统计学理论检验证明二维正态直线回归方程能客观反映出 疫苗荧光阳性细胞数与蚀斑数的相互关系，利用所建立的回归方程，通过计数荧光阳性细胞数 (FAC+)可快速的估计出疫苗中的蚀斑(PFU)数。在此基础上，建立了一种快速检测马立克氏病 病毒蚀斑的方法，将该方法运用于三价疫苗的实验室制备过程和疫苗效价检测中，结果表明：用 该方法测得的PFU数与已有方法测得的PFU数目之间，经方差分析无显著差异。 与已有蚀斑检测方法相比较，该方法可以在3～4小时测出疫苗中的PFU数目，采用本文所建 立的快速检测方法不但可有效、快速估计出疫苗中的PFU含量，而且还能计数多价苗中不同毒株 各自蚀斑数，克服了已有方法用时长的、操作复杂的缺点，可用于马立克氏病多价疫苗生产和使 用中蚀斑的快速检测定量。 关键词：鸡马立克氏病，疫苗，病毒蚀斑，快速检测 m Abstract Mareks disease causeda virus disease．It disease(Marek。SMD)is byherpeslymphoproliferative has anditcauses loss aworldwidedistribution enormousof diseasehasbeen poultryindustry．Marek’S controlled vaccinationwith is effective．111e live．Today,thisstrategy efficientlyby unusually efficiency ofvaccineandimmuneeffectisthe tocontrolthedisease unit key triumphantly．neplaqueforming (PFU)ofvaccineis as indexofvaccine vaccinesofMD adoptedmajor efficiency．Inpolyvalent is PFUdetectedtraditionaldetection needs4-6 method，which productionprocess，the by daysgenerally． PFUofvaccineCannotbedetectedbefore the