dbdb自发性糖尿病小鼠小肠黏膜吸收通路研究.pdf

中文摘要 db／db自发性糖尿病小鼠小肠黏膜吸收通路的研究 摘 要 目的：临床上糖尿病常引起多种消化道症状，病人常表 现为腹泻、便秘、上腹胀痛等症状，使病人不能正常消化食 物，导致吸收不良，其发病机制目前尚不太清楚。现在大多数 学者认为糖尿病胃肠功能紊乱的发病与自主神经病变有关， 但也有临床和实验室研究发现在无自主神经病变时亦可出 现胃肠功能紊乱。目前，有关糖尿病的胃肠动力学研究较多， 但有关小肠黏膜的吸收通路的形态学研究较少，鉴于此，本 研究以db／db自发性糖尿病小鼠为研究对象，应用光镜、扫 描电镜、免疫组化等方法研究了小肠黏膜吸收通路的形态学 改变以及其上的胰岛索受体和杯状细胞分泌的粘原颗粒有 无改变，为进一步研究糖尿病的消化系统并发症提供形态学 基础。 方法：引进日本C57bl／ksj—db／+m表型正常隐性基因小 鼠，饲养于无菌包中，自由摄食饮水、近亲(兄妹)交配，其纯 合子后代，即db／db小鼠，表现为肥胖和糖尿病，是研究非胰 II型)的良好动物模型。分别选取 岛素依赖型糖尿病(NIDDM 3、5、6、8、10月龄db／db糖尿病小鼠及相应年龄段的db／+m 正常小鼠，每组6只。部分标本用4％多聚甲醛灌流固定后， 从距Treitz韧带约lOcm处切下一段空肠，用于光镜、免疫 组化及PAS染色：部分标本用Karnovesky液灌流固定，从同 样部位取下一段空肠，用不同当量浓度的NaOH消化后用扫 描电镜观察小肠黏膜上皮及上皮下固有层的结构。 中文摘要 结果：1db／db糖尿病小鼠于生后3～4周龄时，其血糖 开始升高，并且随着糖尿病的进展，血糖逐渐升高，而对照 组血糖无明显变化。糖尿病组小鼠体重较正常对照组也明显 增加，(10月龄时糖尿病小鼠体重急剧下降，但仍高于正常对 照组)，对照组体重无明显变化。 2在光、电镜下db／db糖尿病小鼠与db／+m正常小鼠相比， 小肠黏膜出现了明显的形态学改变。 2．1光镜：正常小鼠小肠绒毛排列整齐，一k-皮细胞呈柱状，排 列整齐，细胞核椭圆形，靠近细胞的基底面，上皮细胞之间可 见杯状细胞，绒毛中轴不宽大、无皱缩。糖尿病组小肠绒毛 较正常对照组宽大，不规则，上皮细胞形态基本正常，排列 不象正常对照组整齐，并且部分上皮细胞变薄，绒毛中轴有 的有皱缩，并与上皮剥离。 2．2扫描电镜： 2．2．1绒毛：正常对照组小肠绒毛呈比较宽厚的叶片状，排 列整齐、规则，表面有纵横交错，深浅不一的裂隙。糖尿病 组小肠绒毛均比正常对照组要宽大，绒毛自身多弯曲，其上 裂隙多而深，糖尿病组随病程进展小肠绒毛的形态未见有明 显的规律性变化。 2．2．2上皮细胞：对照组上皮细胞呈柱状，在上皮细胞的游 离面有排列紧密而整齐的微绒毛；在上皮细胞侧而环细胞顶 部的细胞膜光滑平整，继而向下出现许多纵行且排列规则的 微皱褶，愈近底部微皱褶稀而不规则；部分上皮细胞根部变 细，相邻上皮细胞间形成侧面间隙，类似孔状。糖尿病组上 皮细胞游离面的微绒毛在形态上与对照组无明显差别，但数 量要比正常对照组少；上皮细胞侧面上部环细胞顶部的细胞 中文摘要 膜光滑平整区不规则，侧面上部的微皱褶变得稀疏，排列不 规则，下部的皱褶未见有明显的变化；上皮细胞根部相邻细 胞闻孔状结构增多。糖尿病组随瘸程进展上皮纫飚豹彤态未 见有明显的规律性变化。 2．2，3绒毛中轴：正常对照组绒毛中轴内有成纤维细胞及成 纤维细胞产生的纤维互相交织成网，并形成较多的筛状孔， 割断扫描电镜观察，这些筛状孔与上皮细胞裉韶之间的闻隙 及中轴内的毛细血管或毛细淋巴管相互对应，形成固定的物 质通道。糖尿病组绒毛中轴内纤维排列与对照组相院无明显 区别，只是纤维互相交织所形成的筛状孔要比正常对照组 多，这些筛状孔的沟通关系与正常对照组未见有明显的不 同。 3免疫组织化学染色结果： 胰岛素受体(Insulin IR)在小肠黏膜主要表达 Receptor 在上皮细胞的细胞膜和细胞质，在黏膜下层和肌层的细胞也 有IR的表达。糖尿病组(DM)比同月份正常对照组(N)IR 的表达量明显减少(P0．05，P0．01)，糖尿病组中5月龄IR 的表达量最高，10月龄表达的最少，