荷斯坦奶牛活体采卵与体外受精技术研究.pdfVIP

y933679 分类号： S82§：3 单位代码： !QQ竖 密级：公珏 学 号： Q3Q2Q2Q5Q!!Q 荷斯坦奶牛活体采卵与体外受精 技术研究 Fertilization The ofovum andInⅥtro study Pick-Up Cow onHolstein Technology 学位申请人： 麻柱 指导教师： 桑润滋教授 学科专业： 动物遗传育种与繁殖 学位类别： 农学硕士 授予单位： 河北农业大学 答辩日期： 二Oo六年六月十三日 摘要 本研究对影响荷斯坦奶牛活体采卵(ovum pick．up，oPu)效果的主要因素进行了 探讨，并对提高荷斯坦奶牛早期胚胎体外发育率的方法进行了研究，旨在建立一套比 vi仃D 较完善的荷斯坦奶牛活体采卵．体外受精“n f融iljzation，ⅣF)技术操作体系。研 究的主要内容为：影响荷斯坦奶牛活体采卵效果的主要因素研究、提高荷斯坦奶牛早 期胚胎体外发育率研究和荷斯坦奶牛胚胎体外化生产操作体系研究。 不同采卵时间间隔(第一次、间隔3d、间隔7d、间隔14d)以及采卵前FsH预处理 对活体采卵效果的影响，结果表明：oPu负压影响卵母细胞的回收率和质量。70mmHg B级卵母细胞率为48．61％，显著低于其它各组(Po．05)，其它各组问差异不显著。 在本实验条件下，综合考虑卵母细胞回收率和质量，采用负压110mmHg可以获得较 影响可穿刺卵泡数量、获卵数和回收率。采用3d的时间间隔进行OPu，头均穿刺数 与对照组差异均不显著。 在提高荷斯坦奶牛早期胚胎体外发育率的研究中，对比了不同培养液对早期胚胎 体外发育的影响。结果表明，将原培养体系的发育液IvMD．101替换为 12．26％，8．49％)相比差异显著(PO．05)；ITs的最佳添加浓度为10pl，ml。 在荷斯坦奶牛胚胎体外生产体系研究中，将活体采卵获得的卵母细胞经体外成熟 后用常规精液和性控精液分别受精，然后进行体外培养，结果表明：x、Y精子分离 的性控精液可以成功的应用于奶牛体外受精，生产预知性别的奶牛胚胎，桑椹胚率为 27％，囊胚率为18％，与用常规精液进行体外受精的效果相比没有显著差别。 总之，将OPu技术与IvF技术相结合进行荷斯坦奶牛胚胎的体外化生产是完全 可行的，本研究共OPu12次，每次0Pu头均获可用卵7．5枚，经体外受精后获囊胚 1．2枚。 关键词：奶牛；活体采卵；体外受精；卵母细胞；胚胎 The ofovum andInVitroFertilization study Pick-Up Tech玎oIogy onHolsteinCow Au也or：MaZhu Genetics， Major：A血mal Breeding柚dReprodIlcti彻 Runzi Ad“sor：Sang Abst