新生儿窒息后血清诱导HK2细胞损伤的作用及其细胞内信号传导机制的研究.pdf

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本研究基金来源: 四川省杰出青年学科带头人培养基金 (No.04ZQ026—033) 四川省中医管理局重点科研基金 (No.200239) 第一部分 新生儿窒息后血清诱导HK一2细胞损伤的作用研究 摘要 目的:研究新生儿窒息后血清对人近曲肾小管上皮细胞(HK.2)损 伤的作用。方法:(1)以人近曲肾小管上皮细胞(胍.2)为研究对象。(2) 活细胞计数;生物化学法检测培养液中的LDH漏出率。(5)统计学处理: 各组实验数据均以均数±标准差(x+S)表示。各实验组间进行单因素方 差分析,组问比较采用LSD检验,P0.05为差异有显著的统计学意义。 结果:(1)倒置相差显微镜下观察到与对照组相比,各实验组细胞生长缓 慢,细胞数量与相应对照组相比明显减少,细胞受损明显,细胞形态改变, 上述变化在窒息后第1天,含20%浓度窒息血清组中最明显。而对照组细 胞则呈正常生长状态,细胞贴壁良好,平铺于培养瓶壁,生长迅速,连接 成片,细胞形态呈扁平的多角形,数量正常。(2)同对照组相比,各实验 组HK.2细胞存活率明显下降(聒0.05),活细胞数量明显降低,细胞形态 改变,细胞之间连接松散,折光性增强,似乎吞噬了小颗粒。且窒息后第 1天,含20%窒息血清组的细胞存活率达最低值,活细胞计数降至(0.172 实验组培养液中LDH漏出率明显升高,在窒息后第l天含20%浓度窒息 有显著性p0.05)。实验组中按天数比较,窒息后第3天,第7天比第1 天LDH漏出率依次逐渐减少;而按浓度比较,实验组各天中含2.5%、5 间的血清(再灌注血清)可诱导HK.2细胞的损伤,以窒息后1天的损伤 最为明显。这种细胞模型的建立为进一步研究新生儿窒息后肾损伤的发病 机制和防治提供了实验基础。 关键词:新生儿;窒息;血清;腿.2细胞;细胞损伤 PartOne Theroleof ofNeonatein Inducing Postasphyxial-serum HK-2 of Cells Injury theRole of Abstract:objectiveToInvestigate of Neonatein ofilK-2Cells. Injury Inducing as renal tubular used proximalcell(HK一2cell)was Methods:(1)Human neonataldifferentconcentration of l,3,7 cell.(2)The postasphyxial-serum target after wereusedas day asphyxia attackingmeans.(3)Theexperimentalgroups weredividedinto15 2.5%,5%,1 groups:the 0%,20%attacking of after

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