大鼠脑片培养研究GSK3β对tau蛋白AD样异常磷酸化的作用.pdfVIP

坐主壁丝盔兰塑鲨堕兰堕 堡!：型壅生兰!!垒墨 大鼠脑片培养研究GSK一3B对tau蛋白AD一样 异常磷酸化的作用 摘要 厂 Tangle，NFT)是阿尔茨海默 (神经原纤维缠结(Neurofibrillary disesse，AD)的两大病理特征之一，异常过度磷酸 病(nzheimer’S 化的tau蛋白是NFT的主要成分，而受累神经元内蛋白激酶与蛋白磷酸 酯酶的失衡又是tau蛋白异常过度磷酸化的主要生化机制。体内和体外 kinase一3，GSK一3) 的实验都证明糖原合酶激酶一3(Glycogensynthase 在AD的发病机制中发挥重要作用；—皋研究应用磷酯酰肌醇三磷酸激酶 (phosphatidylinositol kinase kinase C(ProteinC，PKC)的抑制剂GF一109203X(GFX)与培养的大鼠海 马组织切片孵育，在离体水平上调GSK一3D(GSK一3的一个亚型)，造成蛋白 激酶和蛋白磷酸酯酶系统失衡，经免疫印迹与免疫组织化学技术检测的 实验结果显示：单用GFX组PHF—l位点和Tau一1磷酸化水平分别增高 29％和21％，单用婀组分别增高46％和41％，而二者联合应用组分别增高 68％$U 55％：异常过度磷酸化的tau蛋白电泳迁移速度减慢；联合应用wT 和GFX则出现类似AD患者脑中NFT样细胞；若同时应用GSK一3D的特异 性抑制剂氯化锂(Lithiumehloride，LiCl)，则可消除上述的tau蛋白 过度磷酸化的作用；tau蛋白的过度磷酸化与细胞活性降低正相关。这 些研究结果表明：GSK一3B在脑组织切片水平受P13K／PKB和PKC的双重调 节，激活的GSK一3B在tau蛋白磷酸化中起关键作用；在离体水平通过抑 制Pt3K／PKB途径激活了GSK一3$，发生tau蛋白的异常过度磷酸化，以 及tau蛋白的集聚现象。本研究首次在脑片水平阐明了GSK一3B对tau蛋 白在AD样磷酸化中的作用，为AD研究建立了脑片模型。 关键词：阿尔茨海默病；tau蛋白；过度磷酸化；渥曼青霉素；GFX 氯化锂 兰生!!垫墨堂型鲨堕兰堕 ． 堡．!：型塑生望!!!鲨 on roleof kinase一3B Researchforthe synthase glycogen ratbrain tau incultured Alzbeimer—ljke hyperphosphorylation Slice the of 1 one Neurofibri neuropathological tangles(NFT)are Iary disease and 0f A1zheimer’S hallmarks (AD) abnormally