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细胞浓度和环境因子对铜绿微囊藻产 微囊藻毒素的影响研究 姓名：齐寅雪 Qi Yinxue 指导教师：杨虹 教授 Supervisor: Prof. Hong Yang 专业：微生物 Major: Microbiology 研究方向：环境微生物 Research Orientation: Environmental Microbiology 上海交通大学 生命科学技术学院 2010 年 6 月 细胞浓度和环境因子对铜绿微囊藻产微囊藻毒素的影响研究 摘 要 目前我国湖泊富营养化日益严重，蓝藻水华已经成为我国面临的 严峻环境问题之一。多种水华蓝藻会产生毒素，微囊藻毒素 (Microcystin, MC)是蓝藻毒素中的主要类型，威胁人类的健康和社会 经济发展。但它的自身生理功能和产生的诱因尚不明确，一直以来都 被大多数研究者认为是次生代谢产物。许多细菌次生代谢产物的生成 都受到群体效应的影响，但目前针对细胞密度与微囊藻毒素产生的关 系的研究却非常有限。本研究中使用国内外研究较多的藻种铜绿微囊 藻 PCC7806 作为研究对象，首次研究了铜绿微囊藻 PCC7806 产微囊 藻毒素(MC)是否存在群体效应的问题。实验中使用高、低密度接种培 养，检测在不同细胞浓度下单位细胞中微囊藻毒素的变化，结果发现 除了接种初期单位细胞 MC （QMC ）略有上升之外，整个培养过程中 QMC 基本维持同一水平，不因细胞浓度达到某一阈值而突然增加，没 有群体效应现象。推测 MC 的产生贯穿于整个培养阶段，是组成性合 成的，在培养初期便已出现，而不是像许多次级代谢产物那样在对数 期才大量产生。 淀山湖作为上海及周边地区的饮用水水源之一，近二十年来逐渐 呈现富营养化，蓝藻水华中以铜绿微囊藻为优势种。本研究中首次使 I 用统计学方法研究了多个环境因素（光照、铁、磷、氮）对淀山湖中 分离的一株铜绿微囊藻（FACHB-911 ）单位细胞产MC 的共同影响， 尤其是考虑到了因素之间的交互作用。研究结果有助于今后根据环境 变化对淀山湖中铜绿微囊藻产 MC 进行预测。通过全因子析因实验研 究了环境因素对自淀山湖中分离的铜绿微囊藻 FACHB-911 单位细胞 MC 的影响，发现光照、铁、磷对其 QMC 有显著的影响，氮的影响不 显著。根据全因子析因实验中得到的一阶方程，使用最速上升法找到 响应曲面的最佳区域，经中心复合设计（CCD ）实验构造了铜绿微囊 藻 FACHB-911QMC 与光照、铁、磷的二阶方程： 2 Q =6.68+2.09 ×x -15.56×x +0.477 ×x -0.215x ×x -0.023x ×x +2.22 ×x MC 1 2 3 1 2 1 3 2 (x ：光照，x ：铁，x ：磷) 1 2 3 由二阶方程可知光照与铁、光照与磷分别有显著的交互作用。 各因素的影响不是始终不变的，即使只改变其中一个因素的水平，其 对于 QMC 的影响方式也与其他因素有关。若只考虑光照的影响，当培 养基中 Fe+0.107 ×P9.72 时，QMC