可得兰多糖（Curdlan）发酵工艺及分子结构的研究.pdfVIP

中 文 摘 要 可得兰多糖(cuIdl锄)鼹微生物发酵生产的直链无分枝的B一(1-3)一葡聚糖，具有 力Ⅱ热形成凝胶的特殊性质，在食品、轻工、医药、保健摊领域有广泛的应用开发前景。本 论文鞋诱交、簿这褥到戆■融避黟黯囊硪酝}纽a艿蘩椽梵生产蘩糠，磷究e125蘩株产 cI】Idl￡m的发酵特性，应用蛹应面法优纯了发酵培葬基静缀成和发酵培养条{牟；研究黼后 QHlm狮的提取、纯化和分离工艺；分析分离纯化得到的n玎dl觚c口3样品的分子结构并对 其进行初步的分子结构改造研究。主要的研究内容如下； 1)对蘩抹￡125培养静擎因素实验磷究表葫蘩蔫耱、蔗糖、耱蜜鞫酉溶往淀粉作为发 酵的碳源都可以生产Curdlan，但以葡萄糖为最佳碳源，适宜的加入爨为459．P；酵母粉 挺进砖l瓣夔发蘸生产，露显§妻够维持发酵液载簿豹稳定。 正交实验表明碳源和氮源对curdlan发酵嫩产的影响黧著，混合蠢机盐 (K2HIU+№s强)有较显著影响，柠檬酸钾冠显著影响：诞交实验优化的发酵培养基缀合为 为29．L_1，尿嘧啶的添加量不能低于O．39．一。 利用响成颜法获得的墩优培养基组含为(g．L|1)：黼萄糖，的．5、酵母粉，7。64、尿 瀵睫，0，32、羚}蕊+2．豫鬻《瞄)i娲，l。16。鞋往稼戆壤葬基缝会发辩§5参霹，掰缮兹 体对数生长阶段，没有curdlan产出，在氮源基本消耗党后菌体才开始产curdlan。 2)单因索实验表骧Q嬲嗽发酵种予波适宜鲍耱龄秘接静量分另g为l潍秘10％：攫魏 油可以改善发酵液的溶氧水平，有助于提高QlIdlaIl的发酵产量，而用H2Q作助溶氧剂则 不可取；合邋的发酵温度焱30～32℃：发酵培养基合逡的初始pH为6．5，发酵周期为 努巍。 应用嗣威丽设计优化的Q砌髓发酵的培养操作条f辞：为：种龄9．9h，接种量9．8％，摇 床转速208rl黼，发酵培养慕初始pH6．1，发酵时间93．9h，在优化的培养条件下，发酵生 产cl疆覆越，褥至4茨发酵多糕产量走24嫠礁¨‘。 3．7L自动发酵罐实验袭孵院亿的培养蒸组成和培养条件适宜避{予罐发酵，可以此为基 点继续优化；考察罐发酵过程中cI埘蛔浓度与发酵液粘度的变化趋势相两者的关系，得到 用发酵液粘发颚钡《culdl锄产量浓度的模型方程，简化了发酵过程CI列b吸浓度的梭澳《手段 及簿发酵条{每豹控裁。 3)用不同方法研究Curdlan的提取工艺，结果表明醇析法和酸碱法是c删aIl粗多 糖较合适的提取工艺。经优化的提取工艺为：醇析法添加乙醇3—5倍(v／v)、醇析次数3 次；酸碱法加等体积1M的氢氧化钠溶液，使碱的终浓度在0．5M以下，2MHcl调节pH至 中性使QⅡdlm沉淀，然后离心和醇洗。 末，理化实验表明具备QⅡdlm的特性。 4)纸层析和高碘酸钠氧化实验确定cD-3是—种以1—3葡萄糖苷键连结的单糖组份 明cD．3在稀碱溶液中(浓度娜．4nlol肚1)存在三股螺旋构象。红外光谱和核磁共振图谱 分析证明，cD-3具备标准QⅡdkm的分子结构。 采用低取代度法和sPC法制备得到c删锄硫酸化衍生物(cDl迟)，有效改善了 的特征吸收峰。 制备得到QⅡdl孤羧甲基化衍生物(CM—cD)样品，能够溶解于水且保持热凝胶性 能，取代度为O．5。红外图谱显示羧甲基的吸收峰和B—D一(1-3_卜葡聚糖的特征吸收峰；核 关键词：产碱杆菌c125突变株可得兰多糖响应面发酵提取纯化分子结构 VIII AbstI曩ct by a coInposeden盘elyof(13冲啦妇璐ld把酗ka窜苣p∞d∞ed cⅢ啦龇isbac妇瑚po啪蕊对函de has删妇融擞岫of岫枷碱啡u出．姗u螂 indIlcedto觚bj毋吲萨h棚廿lis 0f sL咖e The阳)gessof渤Ⅻo玛p证五c商0n删