氧化苦参碱对人胃癌SGC-7901细胞株生长的影响-.DOCVIP

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临床医学论文-氧化苦参碱对人胃癌SGC-7901细胞株生长的影响* ????????? 作者:闵光涛,曹农,杨伟林,李玉民 【摘要】? 目的? 观察氧化苦参碱对人胃癌SGC-7901细胞株体外增殖率的影响情况。方法? 噻唑蓝(MTT)比色测定法确定氧化苦参碱对胃癌SGC-7901细胞存活抑制作用。结果? 试验浓度下氧化苦参碱对SGC-7901细胞增殖抑制作用呈剂量依赖性,当浓度为12mg/ml时,对SGC-7901增殖的抑制率最大,达到87.63%。结论? 氧化苦参碱对人胃癌SGC-7901细胞的增殖具有明显的抑制作用。   【关键词】? 胃癌;氧化苦参碱;SGC-7901细胞株;体外增殖率 ?   The inhibition on oxymatrine to SGC-7901 cell line determined by MTT colorimetric assay   【Abstract】? Objective? The role of oxymatrine to the proliferation rate of SGC-7901 cell line in vitro was observed.Methods?The inhibition of SGC-7901 was determined by MTT colorimetric assay.Results?The proliferation of SGC-7901 was obviously inhibited by oxymatrine in a dose dependent manner.The inhibitory rate came to the peak at 87.63%,when cultured with matrine at 12mg/ml.Conclusion?Oxymatrine can significantly inhibit the proliferation of SGC-7901 cell.   【Key words】? gastric carcinoma;oxymatrine;SGC-7901 cell line;proliferation rate in vitro   肿瘤的综合治疗中,中医中药治疗是我国具有特色的传统手段。本研究拟用溴化四氮唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromicle,MTT]法探讨中药苦豆子单体成分氧化苦参碱对人胃癌细胞体外增殖的抑制作用。对影响此试验的药物浓度进行探讨,为临床治疗提供理论依据。   1? 材料与方法   1.1? 材料? 人胃癌SGC-7901细胞株(兰州陆军总院生药中心);氧化苦参碱(OM)注射液;RPMI-1640培养液;MTT(噻唑蓝);小牛血清;胰酶;EDTA;PBS   1.2? 方法   1.2.1? SGC-7901细胞培养? 用含100ml/L小牛血清,青霉素、链霉素各2×105u/L的RPMI-1640培养液,在37℃,5%CO2培养箱中培养,2.5g/L胰酶、EDTA消化传代。   1.2.2? 噻唑蓝(MTT)法确定氧化苦参碱对胃癌SGC-7901细胞存活抑制作用? 试验设空白对照组和试验组,取对数生长期的胃癌SGC-7901细胞,加入到96孔板,依次加入不同浓度的氧化苦参碱,每个浓度8个复孔,同时以生理盐水作为空白对照组,于加药72h后加入20μl MTT(2g/L),37℃,5% CO2培养箱孵育4h后,弃上清,每孔加入DMSO 200μl,用酶标仪测定A 490nm值,反映存活细胞数量,据此推测抑制率。公式: 抑制率(IR)=(A无药组-A用药组) /A无药组×100%   2? 结果   MTT比色法显示氧化苦参碱对胃癌SGC-7901细胞生长具有明显的抑制能力,浓度越高,抑制率越强,见表1。   表1? 氧化苦参碱对胃癌SGC-7901细胞抑制作用? (略)   注:*P0.01   3? 讨论   在肿瘤临床治疗及肿瘤生物学研究中,迫切需要建立可靠的抗肿瘤体外药物敏感性检测方法,MTT法[1]利用活细胞内线粒体脱氢酶能将MTT转化为蓝紫色衍生物Formazan的原理来检测活细胞数目。本试验应用MTT比色法观察氧化苦参碱对SGC-7901细胞生长的影响[2,3],OD值的大小反映药物作用后残存活细胞数的多少。Alley的研究表明,MTT试验对照组的A值必须大于0.5才有意义[4]。我们的试验结果对照组的A值均在0.5以上,符合这一要求。肿瘤细胞的消化、传代过程对保证试验成功十分重要,其中关键是消化酶作用时间的掌握,过分消化将损伤肿瘤细胞而可能导致假阳性结果。试验发

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