6070最大摄氧量有氧运动后大鼠心房肌差异蛋白质的筛选及其表达分析.pdfVIP

分类号—— 密级 1 学校代码 iQ麦垒2 学号—20085—020084 60～70％最大摄氧量有氧运动后大鼠心房肌 差异蛋白质的筛选及其表达研究 TheS and Researchofthe creeningExpression DifferentialProteomeinRatsAtrialmuscle after60～70％Maximal Aerobic oxygen uptake exercise 指导教师姓名、职称 塞丝蓥塾撞 研 究 方 向 鎏边鱼厶签丝塑 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二0一一年-pj 摘 要 目的：通过对中小强度有氧运动后大鼠心房肌蛋白质组表达特征 的研究，筛选出对运动产生反应的应激蛋白质，并进一步探讨应激蛋 白质的基因表达水平，为运动心脏蛋白质组学的后继研究提供实验基 础。 组大鼠采用跑台训练建立中小强度(60～70％最大摄氧量)有氧运动 动物运动模型。8周后，提取心房肌组织全蛋白进行双向凝胶电泳 2D (2一DE)，使用ImageMaster 行分析，筛选出差异表达的蛋白质点，并应用基质辅助激光解吸电离 质点的肽质量指纹谱，通过搜索数据库进行蛋白质鉴定，并采用实时 定量逆转录～聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测6个目标蛋白质的 mRNA表达水平。 结果：0)8周中小强度有氧运动后，大鼠的心脏重量增加了1．7％， 心重指数增加了32％；②经图像分析，运动组和对照组心房肌电泳图 于2倍的蛋白质点68个。其中，获得具有5倍以上差异表达量的蛋 白质点14个，7个表现为上调，7个表现为下调。对差异表达的14 个蛋白质点进行质谱分析，成功鉴定出11种蛋白质，如心脏脂肪酸 结合蛋白、热休克蛋白60、线粒体ATP合成酶亚基d、ATP合酶偶 l 合因子6、蛋白组氨酸磷酸酶l、原肌球蛋白码链等；(查)RT-PCR结 果显示：运动组大鼠心房肌中蛋白组氨酸磷酸酶l、热休克蛋白60、 ATP合酶偶合因子6、线粒体ATP合成酶亚基d、原肌球蛋白以链、 心脏脂肪酸结合蛋白的基因表达水平均上调，且具有统计学意义 (尸o．05)。5个目标蛋白质中，只有热休克蛋白60和蛋白组氨酸磷 酸酶l的蛋白表达水平和基因表达水平_．致，其他的均不一致。 结论：①长时间中小强度有氧运动后，大鼠心房肌蛋白质发生了 适应性变化。②质谱确证的心脏脂肪酸结合蛋白、线粒体ATP合成 酶亚基d和ATP合酶偶合因子6等目标蛋白与提高心肌能量代谢水 平和改善心血管功能有关，运动组大鼠心脏发生了良好的适应性变 化。③大鼠心房肌中应激蛋白的基因表达水平与蛋白表达水平不完全 · 一致，蛋白质的表达可能与上游基因的转录等有关，也可能与下游的 翻译、修饰等有关。 关键词：心房肌；有氧运动；蛋白质组；双向凝胶电泳；质谱；RT-PCR n ABSTRACT Intention：Discussionatrial characteristicsandSe proteinexpression