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第1节 DNA是主要的遗传物质
——“DNA的粗提取与鉴定”实验改进
【摘要】 本文通过采用新的实验材料和新的实验方法,总结出一种简单易行的DNA粗提取与鉴定的方法,不仅降低了成本,简化了操作步骤,而且较好地达到了实验目的及要求,提高了实验的成功率。
【关键词】 实验材料 提取方法 鉴定
生物学是一门以实验为基础的自然科学,生物学实验是中学生物学的重要组成部分,在学生的学习过程中有非常重要的作用。①实验可以激发学生的学习兴趣,有兴趣的学习活动可以促使学生集中精力去获取知识,并创造性地完成任务。生物学实验直观、形象、生动,有较强的思考性,必然会使学生产生强烈的好奇心,引起学生的注意,唤起学生探索生命现象和生命活动规律的积极性。所以,善于激发学生的兴趣,就意味着抓住了学生的注意力,抓住了学生的注意力,就意味着调动了学生的积极思维,有了思维,就必然产生良好的学习效果。②实验是学生获取和巩固生物学知识的重要基础。无论是探索性实验还是验证性实验,都可以使学生对所学的生物学现象和规律有更深刻的理解和记忆,两种实验都有获得和巩固知识的功能。通过实验,既能验证教师讲课内容的正确性,也能巩固学生对知识的理解记忆和对有关技能的掌握。③实验可以培养学生的创新能力。通过实验,不仅使学生获得充分的感性知识,而且使学生的观察力、操作技能、科学态度、分析判断及综合能力、探索求新的创造能力都得到同步的提高。以观察能力和实验能力为基础,以思维能力为核心,让学生通过分析、比较、判断、推理,经过抽象的逻辑思维和辨证思维进而形成概念、规律,使学生的思维力得到提高。通过设计实验可以培养学生初步的研究能力和创造能力。④实验可以提高学生的科学素质。学生在实验过程中观察到生物体的形态结构、生理功能等种种生物现象,这对他们有强烈的吸引力,从而能够激发他们的学习兴趣和求知欲。通过实验,使学生学会生物实验的基本技能,受到科学方法和科学思维的训练,提高实验能力;通过实验,使学生养成实事求是的科学态度,不断探求新知识的精神以及团结互助、合作共事的优良品质。
因此,在中学生物学实验教学中,如何开展实验,如何优化实验过程,如何进行生物实验设计是对教师能力的基本要求。本文是对“DNA的粗提取与鉴定”实验的改进。DNA粗提取实验在人教版高中《生物》(第二册)中是学生必修实验,该实验以鸡血为材料进行。但因为实验操作步骤较为复杂,时间长,一节课完成本实验难度较大,所以本文探索用新的实验材料和方法以便提高实验效率,缩短实验时间,达到良好的实验效果。
⒈ 实验原理
遗传物质DNA为白色丝状物,在细胞中与蛋白质结合在一起,绝大部分存在于细胞核中,在浓度较高的氯化钠溶液(物质的量浓度为2mol/L)中,核蛋白容易解聚,游离出DNA。而DNA在浓度较高的氯化钠溶液中的溶解度很高,钠离子与带负电荷的DNA结合成DNA钠盐,这时DNA在溶液中呈溶解状态。
DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质可以溶于酒精溶液,利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。二苯胺法鉴定DNA的原理是:DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛,它再和二苯胺作用而显蓝色(溶液呈浅蓝色)。
⒉ 目的要求
初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法,观察提取出来的DNA物质。
⒊ 材料用具
洋葱
研钵,石英砂,漏斗,纱布,烧杯,玻璃棒,药匙,试管,体积分数为95%的酒精溶液,2mol/L的氯化钠溶液,二苯胺试剂
⒋ 方法步骤
由于选择了与课本不同的实验材料,实验步骤也作了相应的删减。原则是紧扣实验原理,简化实验步骤。
⑴称取30克已切碎的洋葱,放入研钵中,加入少量石英砂助研,倒入10mL 2mol/L的氯化钠溶液,充分研磨。
洋葱含有挥发性刺激物,有效减少刺激,才能使实验顺利进行。上课前,教师可先将洋葱放入冰箱冷冻一会儿,使其凉透但又不能结冰;或将洋葱切成几大块,放入清水泡一会儿,让其挥发性刺激物溶于水,可以减轻刺激。然后将洋葱切碎备用。研磨的目的主要是使洋葱细胞破裂,使DNA溶于2mol/L的氯化钠溶液,没必要将洋葱研成粥糊状,后者既浪费时间又影响实验效果。研磨时,切忌使用搅拌器(榨汁机)。使用搅拌器虽可以提高研磨效率,但搅拌器将洋葱切成极细小的颗粒,无法通过过滤将洋葱颗粒剔除。只能将酒精直接倒入滤液中,许多洋葱小颗粒因为轻会漂浮起来,DNA藏在其中,无法分辨。学生看不到白色纤维状粘稠物的DNA。
⑵研磨后,用漏斗和纱布将汁液过滤到小烧杯中,得到滤液。
⑶向滤液中加入95%的酒精溶液20mL,沿烧杯壁缓缓倒入,不要震动或搅拌。
此时,烧杯中的液体分为上、下两层,下层较浑浊,上层澄清,很快上层溶液中就会有白色纤维状粘稠物析出,用玻璃棒可将其轻轻卷起。这就是记录生命
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