雨生红球藻信号物质的研究.pdfVIP

摘 要 汤育，作为饲料添加剂、天然食用色索和生物保健品活性成分，具有很好的应用前景，目 前国际市场上价格昂贵，供不应求。甫生红球砚是虾青素的良好资派。但是，由于种种原因限 制.红球燕细胞培养仍然不很理想，成为限制工程规模放大和开发该生物资派的瓶颈。那么， 是否在光照、沮度、pH,营养盐等传统形响因子之外，还有调节红球旅细胞生长的重要因子? 目前国内外尚不清楚。 在国家自然科学荃金和国际科学荃金资助下 围绕红球藻是否产生调节细胞周期信 号物质的话且，利用红球藻处理过的旧液重折进行该藻培养，在排除其它影响因子的荃础上， 初步结果表明红球旅确实产生某种物瓦抑制自身生一长.(1m.研究结果总结如下: 1、在静t培养时，通常难于直接观察到归滚对蔽细血的抑制现象，这主要是由于其它因素 (如无机谈等)的存在掩盖了抑制物的作用。因此，不难理解为什么以往研究大多忽视抑制物 问题。 2、在通气和加富二氧化碳通气培养时，旧液对藻细胞的抑制现象就比较容易发现.该物质 可溶于二甲荃亚枫等有机溶剂的物质、可以用乙酸乙幽从泊液中提取出来。尽管旧液中存在碳 酸根和碳酸氢根等无机碳.但它们不是抑制性信号物质。 3、该信号物质的产生与藻培养的时间也有一定关系，藻培养的初期并不大量积景，但在培 养过程 (特别是在培养的中、后期)逐渐形成，井积累在旧浪中。这就可以从一个侧面阐述为 什么常常难以长时间维持红球藻细胞的连续培养。 4、该信号物质的产生与处理藻细胞密度有关，细胞密度越大，红球藻产生的抑制性信号物 质就越多。因此，高密度培养和超商密度培养中.抑制物是较为严重地限制红球藻细胞生长的 问题之一，可能也是徽旅 (甚至细血)培葬中值得研究和关注的话月。 5、红球旅游动细胞是抑侧性物质产生的主要阶段，随着游动细脸转化成不动细胞，该信号 物质井没有明显增加的迹纽。 6、尽管目前还不清楚抑侧物如何调节红球旅细血周期，但是，在旧液中或有抑俐性物质存 在条件一F，红球藻游动细胞分裂受阻，数盘下降，同时不动细血效盈增加。推侧抑制物有抑制 游动细胞分裂，和促进游动细胞向不动细自转化的作用。同时，有关DNA含盈和DNA倍性结 果也初步表明，红球旅游动细胞DNA复制过程没有受形响，但随后的细班服生质分裂过程受 阻。至于红球旅游动细胞的硕生质分理受阻，和该盆细血周期进入不动细盆阶段之间可能存在 的机制，还有待进一步探讨，仁产/ 尸 总之 证明了红球旅在生长过程中向自外释放降低细血J长和诱导细胞转化的信号 物质，这是细胞生长的又一个限制因子，为提高细脸培养密度和裸入了解细班周期调控机制提 供了基础掀据。 关健词: 红球蔽 旧液 抑侧物质 提取物 游动细胞 不动细胞 DNA 导 言 虾青素 (3,3一二轻基-4,4--氧e-胡萝 卜素)是0-胡萝 卜索的一种衍生物，可以作为 饲料添加剂、天抓食用色素和生物保健品活性成分，具有很好的应用前景。由子虾青素的传统 来源是虾、盆外充，虾、组外充中的虾青素含t低，难于开发。虾青素化工合成复杂.工艺条 件要求高，成本高。目前国际市场上虾青素价格昂贵，井且供不应求。 雨生红球藻 (简称红球蔽，Haematococcuspluvialis)是一种单细胞绿藻，在特定条件下可 以产生大里虾青素.有时虾青素含ti可占千重1-2%以上 (Grungetal.,1990)，占红球藻中类胡 萝 卜素总盆的75%以上，其分子式为C,0F13204.虾青索主耍以酸化 (单酮和双酸)形式存在于 细胞质中(Santosetal.,1984;Renstrometal.,1981;LuFanetal.,1995;Grungetal.,1992;Yuanet al.,1996)，常常将整个叶绿体遮盖，使细胞呈现红色.虾育素的生物合成是在系列醉的催化下， 由0.胡萝 卜素经过两条途径合成的 ((Luetal,1995;Harkereta1.,1995)· 利用雨生红球藻开发天然虾青紊是近年来徽藻领域的一个热门话且，大量关于细胞生长、 虾青素A积、培养和其它相关技术的