Apigenin（Api）抑制NO、iNOS产生和软骨细胞凋亡在体研究.pdfVIP

中文摘要 目 的 研究Api在体水平能否抑制NO、iNOS产生及软骨细胞凋亡，成为治疗 OA的药物成分。 方 法 动物随机分组(1)假手术组(2)手术组(3)手术加注药组，每组8只。 (1)假手术组：在无菌条件下，切开兔右膝皮肤，直接缝合。2周后，膝内注 射二甲基亚砜(DMSO)，每只0．1ml，每周一次，每周二次腹腔内注射0． 1mlDMSO，连续四周。(2)手术组：在无菌条件下，切断兔右膝前交叉韧带 和髌韧带。2周后，每只右膝内注射0．1mlDMSO，每周一次，每周二次腹腔 15mg给予。术前抽取每只兔耳缘静脉血2ml，离心取上清液，封存，超低温 保存备测，处死前再次抽血，封存备测。术后6周，处死动物，切开右膝关 节，肉眼观察各组动物关节软骨及滑膜情况，切取关节软骨及滑膜标本，标 记。右膝关节软骨分成三部分：一部分做组织学观察，HE染色、甲苯胺蓝 染色；一部分行电镜观察；另一部分行流式细胞术检测。取血清上清液 37℃水浴溶解后，按NO和iNOS试剂盒操作步骤，测定OD值，计算含量。 结 果 血清NO值术后6周手术组与假手术组有极显著性差异，P0．01；注 药组与假手术组有极显著性差异，PO．01；手术组与注药组有显著性差异， 01；注药组与假手术组组有极显著性差异，P0．01；手术组与注药组有极显 著性差异，PO．01。手术组与假手术组软骨细胞凋亡率有极显著性差异，P 0．01；手术注药组与假手术组有极显著性差异，PO．01；手术组与注药组 有极显著性差异，P0．01。肉眼观察：手术组病变软骨无光泽，呈淡黄色， 表面粗糙，局部菲薄，偶可见皲裂及溃疡形成，手术注药组改变较轻。光镜 观察：(1)HE染色：手术组可见坏死区域软骨细胞消失，残存细胞核红染， 软骨基质纤维变，着色不均，细胞增殖活跃，存在簇集现象，可见裂隙形成深 达钙化区，手术注药组改变较轻。(2)甲苯胺蓝染色：坏死区及纤维变区不 染，残存软骨细胞和簇集软骨细胞核蓝染，细胞浆呈紫红色或深蓝色。滑 膜：手术组滑膜局部充血、增厚，软骨严重退变的滑膜表面形成绒毛状结构， 滑膜下层出现纤维素变性，手术注药组改变较轻。电镜观察：手术组可见细 胞变形，胞质内充满脂滴，细胞核变形，细胞周晕消失。 结 论 本研究证明在体水平Api抑制NO、iNOS产生及软骨细胞凋亡，有可能 成为治疗OA的药物成分。 关键词：Api；软骨；细胞凋亡；一氧化氮；一氧化氮合酶；骨关节炎 ·2· ABs-rRACT Objectives The WaS to whether can inhibit objective the primary investigateapigenin of andthe of in NO、iNOS vivo．The ob- produce cartilage secondary apoptesis was can a to whether become candidate． jective probe ap