大肠杆菌O157及其Stx2免疫胶体金层析检测方法的建立.pdfVIP

中国兽医科学 2009，39(02)：154158 ChineseVeterinaryScience 中图分类号 ：S852．612 文献标志码 ：A 文章编号 ：1673—4696(2009)02—0154～05 大肠杆菌 O157及其Stx2免疫胶体金层析 检测方法的建立 高成秀 孙建和，严亚贤 (上海交通大学 农业与生物学院上海市兽 医生物技术重点实验室，上海 201101) 摘要 ：建立了大肠杆菌o 和志贺毒素 2(Stx2)的双抗体夹心免疫胶体金层析法，并运用该方法对上海 市兽 医生物技术重点实验室保存的已鉴定的 58株大肠杆菌进行 了检测，评估 了其特异性 、敏感性和重复性。 结果显示，大肠杆菌O 层析法的敏感性为 1×10CFU／mI，特异性为87．5 ，批间和批 内变异系数分别为 8．6 和 0；Stx2层析法的检测下限为 200 L细菌培养液，特异性为 50．0 ，批 间和批 内变异系数分别为 50．0 和33．0 。表明，该免疫胶体金层析法能快速、简便、特异地检测大肠杆菌O ；结合对Stx2的检测， 能快速检 出产 Stx2的大肠杆菌O 菌株 。 关键词 ：免疫胶体金层析 ；大肠杆菌O ；志贺毒素 2 Developmentofcolloidalgold immunochromatographicassaysforrapid detectionofEscherichiacoli0157andStx2 GAO Cheng—xiu，SUN Jian—he，YAN Ya—xian (1．ShanghaiKeyLaboratoryofVeterinaryB Pc矗”0z。g ／Sf0。ZofAgricultureandBiology， ShanghaiJiaotongUniversity，Shanghai201101，China) Abstract：Twocolloidalgoldimmunochromatographictestsweredevelopedbasedondouble—antibody sandwichassayforrapiddetectingEscherichiacoli(E．coli)0157andShigatoxin2(Stx2)，respectively．The sensi’ti’v—ities，specificitiesandcorrelationswereevaluatedwith58knownE．colistrainsinShanghaiKeyLa— boratoryofVeterinaryBiotechnology．ThesensitivityandspecificityofthetestforE．coli0l57werel×lO CFU／mI，and87．5 ，respectively．Coefficientofvariation(CV)ofthetestforE．coli0ls7were8．6 and 0ininter～assayandintra—assay，respectively．ThedetectionlimitofthetestforStx2was200IxLbacterial culture．ThespecificityofthetestforStx2was50．0 ．CVofthetestforStx2were55．0％ and33．0 in inter—assay and intra—assay，respectively．Theresultsrevealed thatthe colloidalgold immunochromato— graphicassayfordetectionofE．coli0157wasrapid，convenientand specific，andcouldrapidly detectthe Stx2一producingE．coliOls7incombinationwiththecolloidalgoldimmunochromatographictestfordetec— tionofStx2． Keywords：colloidalgoldimmunochromatography；Escherichiacoli0157；Shig