相同基因型大白菜基于不同倍性水平的生物学性状及基因表达研究.docVIP

硕士学位（毕业）论文 相同基因型大白菜基于不同倍性水平的生物学性状及基因表达研究 学位申请人： 滑 帆 指导教师： 申书兴 教授 顾爱侠 副研究员 学科专业： 蔬菜学 学位类别： 农学硕士 授予单位： 河北农业大学 答辩日期： 二〇一四年五月三十一日 分类号： S634.1 单位代码： 10086 密 级： 公开 学 号： 2011288 相同基因型大白菜基于不同倍性水平的生物学性状及基因表达研究 Research on the biological character and gene expression of different ploidy Chinese cabbage with the same genotype 学位申请人： 滑 帆 指导教师： 申书兴 教授 顾爱侠 副研究员 学科专业： 蔬菜学 学位类别： 农学硕士 授予单位： 河北农业大学 答辩日期： 二〇一四年五月三十一日 独创性声明 ? 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得 河北农业大学 或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 ? ? 学位论文作者签名： 签字日期： 年 月 日 ? ? ? 学位论文版权使用授权书 ? ? 本学位论文作者完全了解 河北农业大学 有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权河北农业大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 （保密的学位论文在解密后适用本授权书） ? 学位论文作者签名： 导师签名： ? 签字日期： 年 月 日 签字日期： 年 月 日 ? ? 学位论文作者毕业后去向： 工作单位： 电话： 通讯地址： 邮编： 摘 要 以本实验室特有的大白菜“85-1”单倍体为试材，通过秋水仙素对其进行诱导，经细胞学鉴定、DNA流式细胞仪鉴定获得了相同基因型二倍体、四倍体大白菜植株。对相同基因型大白菜单倍体、二倍体、四倍体进行了植株特征特性调查、细胞形态学观测等，比较了相同基因型不同倍性大白菜在生物学特性方面的差异；同时利用实时荧光PCR技术开展了对控制大白菜器官大小的ARGOS基因、与同源染色体联会相关的ASY1基因在单倍体、二倍体、非整倍体和四倍体植株间基因表达水平的研究，进而分析了不同倍性大白菜特性与相关基因表达的关系。主要研究结果如下： 1. 浓度0.2%秋水仙素处理大白菜单倍体组培苗48 h得到二倍体的诱导率为13.72%，且处理后植株长势良好。选用此处理浓度和时间对单倍体大白菜“85-1”进行诱导，获得了相同基因型的单倍体、二倍体、四倍体植株。 2. 以来自于同一单倍体的二倍体大白菜为母本与四倍体大白菜杂交，取授粉后8d的子房在改良White中进行离体培养获得了成活胚珠。将成活的胚珠接于1/2MS培养基上培养，30 d后得到再生植株，根尖染色体计数结果表明，获得的植株为非整倍体大白菜（2n=24）。 3. 相同基因型的单倍体、二倍体、非整倍体和四倍体大白菜在植株性状、细胞学形态方面均表现出差异。随着染色体数目的增加，单倍体、二倍体、非整倍体、四倍体叶片呈增加的趋势。与单倍体植株花器官相比，二倍体、四倍体以及非整倍体植株花蕾和花瓣明显增大，花瓣形状为倒卵形；单倍体花药较小、有少量或无花粉，二倍体、四倍体花药正常、且均有花粉。 4. 利用实时荧光PCR对相同基因型的单倍体、二倍体、非整倍体和四倍体大白菜叶片、花蕾中的的ARGOS基因进行基因表达差异的研究，结果表明：在叶片和花蕾中ARGOS基因的表达量，均随着倍性的增加呈非线性增加的趋势，与不同倍性大白菜叶片、花器官大小变化趋势一致。相对于二倍体大白菜叶片ARGOS基因表达而言，单倍体叶片ARGOS基因表达量最低，仅为二倍体表达量的0.451倍；四倍体叶片ARGOS基因表达量最高，为二倍体表达量的2.