核桃NBS类抗病基因类似物的序列特征及其与炭疽病的抗性_安海山.docVIP

中国农业科学  2014,47(2):344-356 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.02.014  核桃 NBS 类抗病基因类似物的序列特征及其与炭疽病的抗性  1  1,2  （1 山东农业大学林学院，山东泰安 271018；2 作物生物学国家重点实验室，山东泰安 271018） 摘要：【目的】利用同源序列法分离核桃的NBS（Nucleotidebindingsite）类抗病基因类似物，为核桃抗 炭疽病分子辅助育种及抗病基因的克隆提供基础。【方法】以35个核桃优系为试材，利用接种法鉴定供试材料对 炭疽病的抗性；根据已知植物抗病基因的保守结构域P-loop和GLPL设计简并引物，以核桃优系的基因组DNA为 模板，通过PCR扩增NBS类抗病基因同源序列片段，并分析所得NBS类抗病基因类似物与核桃优系炭疽病抗性的 关系；利用BLASTN/X程序对所得NBS序列在GenBank数据库中进行同源性搜索；利用MEGA5.2及DNAman7.0等 软件对其进行序列相似性分析和系统进化研究。结果】35个供试核桃优系中，有20个优系为抗炭疽病类型（R）， 其相对抗性指数在0.63—0.82；有5个优系为中抗类型（M），相对抗性指数在0.27—0.56；有10个为感病类型 （S），相对抗性