附睾蛋白激酶抑制剂Eppin和精囊蛋白Semenogelin+1相互关系研究.pdf

南京医科大学博士论文 1相互关系研究 附睾蛋白激酶抑制剂Eppin和精囊蛋白semenogelin 摘要 EPPIN(sPINLwl；GeneID：57119)基因是一种在附睾和睾九组织中特异 性双表达并编码含胱氨酸残基丰富的蛋白质的单拷贝基因。其基因结构中 含有KuNITzE和wAP两种特点的基因类型，有含四个二硫键为核心的类似 于蛋白激酶抑制剂样结构为特点的基因序列。本研究用六种不同的实验方 法表明排精后的精浆中和在精子表面，精子表面的EPPIN结合来自于精囊 子表面蛋白和精浆蛋白中行免疫沉淀法可沉淀出精囊蛋白semenogelinl； Eppin和semenoge1in两者在精子表面共同定位；3)体外重组EPPIN及重 行免疫共沉淀法，可沉降相应的结合蛋白；4)用重组Eppin和重组 semenogel 125标记的重组Semenogelinl能饱和性结合重组Eppin，无放射性标记的 组Semenogel in能直接与印迹膜上的重组Eppin结合的放射自显影法。 semenogelinl的不同氨基酸片段，发现c端Eppin75—133氨基酸片段与 S9164—28 s2 Semenogelinl中唯一的胱氨酸残基(cy 39)。还原化或羧甲基化后的胱氨 酸残基失去与放射性碘125标记的重组Eppin的结合能力，表明 南京医科大学博士论文 semenogel in的氨基端氨基酸序 semenogelin结合中的关键作用。Eppin乖semenogel 的复合体在精子表面的生理意义可能是协同保护精子抵抗微生物的侵袭， 用，对精子在女性生殖道中的生存和受孕至关重要。 关键词：附睾蛋白激酶抑制剂Eppin，精囊凝固蛋白semenogelin 南京医科大学博士论文 Associationof Protease Epididymal 1 Human on Semenogelin Spermatozoa ABSTRACT s a ID：57119)i 聊拍(SPINLWl；Gene singlecop3r geneencoding a found inthetestis and cysteine—richproteinonly epididymis， whichcontainsboth and fourdisulfidecore Kunitz—typeWAP—type inhibitOrconsensus s demonstratesthat prOtease sequences．Thistudy inseminal andonhuman plasma spermatozoafollowing i s boundto I Sixdifferent Eppin