类风湿关节炎免疫吸附剂制备及吸附机制研究.pdfVIP

中文摘要 血液灌流是治疗疑难疾病的有效方法，其核心是吸附剂。类风湿关节炎(RA)是…种典 型的自身免疫性疾病，病人血液中存在大量的致病物质一类风湿因：子(RFs)。目前，医学 卜无满意的治疗方法，被称为“不死的癌症”。血液灌流可以选择性地清除RFs，是治疗 RA的有效方法。本文综述医用吸附剂研究现状，针对类风湿关节炎的治疗，根据免疫学 原理，提出制备吸附性能好、选择性高、良好的血液相容性、适合全血灌流的免疫吸附剂， 并对吸附机制进行研究。主要方法是以纤维素为载体，DNA或氨基酸为配基通过共价键键 联于载体上，研究影响吸附性能的因素，采用动物模型评价其血液相容性，采用化学修饰 方法研究吸附机制，同时以DendrimerPAMAM分子为手臂制备吸附剂，为开发吸附剂制 ， 备新方法做一有益探索。I主要结果如下： f 一、吸附剂制备及性能研究 1、利用悬浮再生法合成了不同浓度的球形纤维素载体。其中，10％纤维素凝胶机械强度最 好，环氧氯丙烷活化后环氧基团含量高，是一种较理想的免疫吸附剂载体材料。 2、用环氧氯丙烷对10％纤维素凝胶进行活化，最佳条件为：19抽干的10％凝胶载体，加入 量可达82“m01／ggel左右。 达42l-t mol／ggel。 4、将小牛胸腺DNA精制后固定于环氧氯丙烷活化的纤维素凝胶微球上制备RA免疫吸附 剂，详细研究了固定化条件对固定量的影响，固定量随着温度的升高而增加，随着DNA 溶液浓度的增加而增加，固定反应的最佳pH值为8．2。 选择性。 6、制备了以8种具有不同性质的氨基酸为配基的吸附剂，静态吸附实验结果表明，苯丙 氨酸和色氨酸具有明显的吸附优势。 丁二醇二缩水甘油醚．己二胺。戊二醛为手臂，苯丙氨酸和色氨酸为配基的吸附剂，由于 环氧量的不同，导致固定氨基酸的量不同，由多到少顺序为：a)c)b)d)；静态吸附结果 表明吸附量和吸附率随着手臂长度的增加而增加。吸附率和吸附率随着固定量的增加 IgARF的吸附量 而增加，苯丙氨酸为配基高于色氨酸为配基，对IgMRF、．IgGRF、 分别为1759、1358、23641U／ml 8、对长耳白兔进行血液灌流实验，考察吸附剂的血液相容性，结果表明以苯丙氨酸为配 摹的吸附剂对血细胞、血浆蛋白、血浆电解质的影响很小，具有良好的血液相容性。 P,8／MAM支化分子，戊二醛化后固定苯丙氨 9、在纤维素微球上直接合成了1代dendfimer 高15％、9％、13％。是一种新型的制备吸附剂方法。值得进一步详细研究。 二、DNA为配基的吸附剂吸附机制研究 分离的产物为目标物(RFs) 念相互作用。 机制进行研究。即用1，2环己二酮对精氨酸的胍基进行特异性修饰，圆二光谱研究表 明修饰没有破坏其结构，吸附结果显示，随着修饰程度的增加，吸附量下降。晓明正 进行特异性修饰，圆二色光谱研究表明修饰没有破坏其结构，吸附结果显示，随着修 饰程度的增加，吸附量上升。说明负电荷的减少有利于吸附；用溴代琥珀酰亚胺对IgGRF 的吲哚基进行化学修饰，用紫外光谱，荧光光谱，圆二色光谱表征了修饰结果，吸附 结果表明，随着修饰程度的增加，吸附率逐渐增加，说明吲哚基在吸附过程中起一定 作用：用磷酸吡哆醛对赖氨酸侧链氨基进行修饰，紫外光谱和圆二色光谱进行表征， 吸附结果表明，随着修饰程度的增加，吸附量下降，进一步说明IgGRF上的正电荷有 利于吸附。四种修饰得出的结果是统一的：即减少正电荷不利于吸附，减少负电荷(或 增加正电荷)有利于吸附，说明IgGRF与固定化的DNA主要以离子键相互吸附。 总之，本文所制备的吸附剂具有较高的吸附量和吸附率、良好的血液相容性、稳定性、制 各方便、原料来源丰富、使用安全性高的特点，具有较高的l临床应用价值。首次通过 PAMAM支化分子固定氨基酸制备吸附剂，结果表明是可行的，可以有效的提高 dendfimer 吸附量，为吸附剂制备技术提供一种新方法。对固定化DNA的吸 附机制研究填补 了该类吸附剂研究的空白，为新型吸附剂的制备提供了理论依据。