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饲料中粗蛋白质含量的测定 凯氏定氮法 Contents 适用范围 饲料中含氮物质包括真蛋白质和氨化物（非蛋白氮），两者总称为粗蛋白质。 本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料等粗蛋白质含量的测定。 适用范围 测定意义 蛋白质是生命的基础，是细胞组成、酶、激素免疫抗体等的主要成分，是组织更新、修补的原料。 饲料中蛋白质的质和量直接关系到动物生命生长、发育、繁殖和生产，因此，测定饲料中粗蛋白质含量对动物生活和生产有重要作用。 测定饲料原料和成品料中粗蛋白质含量的，为科学配置饲料提供可靠依据。 测定原理 凯氏法测定试样中含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，在用标准浓度的酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白质含量。 仪器设备及试剂 试样选取——四分法 测定步骤 测定步骤 2.试样的蒸馏 取2%硼酸溶液20ml至锥形瓶中作为反应吸收液，并加混合指示剂2滴，将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入该液面下。准确移取试样分解液10ml注入蒸馏装置的反应腔中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好玻璃塞，并在入口处加水密封好。再在碱液入口缓慢加入10～20ml 40%氢氧化钠溶液，亦使之流入反应腔中，并把碱液入口封存好。进行蒸馏。以锥形瓶中溶液变蓝绿色开始计时3min，然后将冷凝管末端离开锥形瓶液面，再蒸馏1min，用少量蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液亦流入吸收液中。 测定步骤 注意事项 每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值作为结果。 本方法不能区别蛋白氮和非蛋白氮。 每次蒸馏结束后，应用蒸汽将蒸馏装置反应腔中残液洗净。 1. 适用范围 2. 测定意义 3. 测定原理 4. 仪器设备及试剂 5. 测定步骤 蛋白氮 （真蛋白质提供氮源 ） 非蛋白氮（氨基酸、酰胺、铵盐 ） 粗蛋白质 样品粉碎机 40目分析筛 分析天平 消化炉 消化管 凯氏蒸馏装置 滴定管 98%浓硫酸 硫酸钾 硫酸铜 硼酸溶液 标准盐酸溶液 混合指示剂 蔗糖 样品 1.试样的消化 称取0.5~1g试样，准确至0.0001g，无损地放入消化管中， 加入硫酸铜0.4g，硫酸钾6g，与试样混合均匀， 再加浓硫酸10ml，将消化管放置在消化炉上加热（此装置 需安装在通风橱内），待样品焦化，泡沫消失，加大火力 至410℃ ，直至溶液呈透明的蓝绿色。将试样消化液冷却， 无损失地转移至100ml容量瓶中，冷却后用蒸馏水稀释至 刻度，摇匀，则为试样分解液。 3. 滴定 用硼酸吸收氨后，立即用0.05mol/L的HCl标准溶液进行滴定，溶液由 蓝绿色变为灰红色为终点。 4. 空白测定 称取蔗糖0.01g，以代替试样，按上述测定步骤进行空白测定， 消耗0.05mol/L盐酸标准溶液的体积应不得超过0.3ml。 5.计算 粗蛋白质（%）=