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- 2017-09-06 发布于重庆
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细胞的分化 2.离体的植物组织和细胞,对营养、环境等条件的要求相对特殊,需要配制适宜的培养基。常用的一种培养基是MS培养基。其主要成分包括:大量元素,如N、P、K、Ca、Mg、S;微量元素,如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co;有机物,如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素,以及蔗糖等。在配制好的MS培养基中,常常需要添加植物激素。 3.植物激素浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等,会影响实验结果。 * * 课题1 菊花的组织培养 通过必修课的学习,我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么,有没有不用种子来培育植物的方法呢? 组织培养 营养繁殖 扦插 嫁接 压条 扦插 嫁接 压条 是指在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体,并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。 组织培养 (一)植物组织培养的基本过程 (1)基础知识 细胞离体 必要条件: 一定的营养物质、激素和其他外界条件 原理: 细胞的全能性 植物细胞具有全能性,即已分化的细胞,具有使后代细胞形成完整个体的潜能。 ②原理: ①定义: 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因 概念: 在个体发育中,相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 结果: 形成不同的细胞和组织 原因: 基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根 芽 植物体 植物组织培养的基本过程 愈伤组织 (二)影响植物组织培养的因素 1.不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。例如,烟草和胡萝卜的组织培养较为容易,而枸杞愈伤组织的芽诱导就比较难。因此,植物材料的选择直接关系到实验的成败。对于同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。菊花的组织培养,一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 MS固体培养基成分及比例 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 阅读课文,思考以下问题 1. 同微生物培养基相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同? 2、你认为组织培养过程中,成功的关键有哪些?这些步骤的适宜条件是什么? 组织的脱分化及愈伤组织的再分化。 植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素,细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。 植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。按照不同的顺序使用这两类激素,会得到不同的实验结果。 当同时使用这两类激素时,两者用量的比例决定着发育的方向,是愈伤组织、长根还是长芽。如为了促进芽器官的分化,应除去或降低生长素的浓度,或者调整培养基中生长素与细胞分裂素的比例。 高 利于根的分化,抑制芽的形成 生长素/细胞分裂素 适中 利于促进愈伤组织的形成 低 利于芽的分化,抑制根的形成 4.除了上述因素外,PH、温度、光照等条件也很重要。不同的植物对各种条件的要求往往不同。进行 菊花的组织培养,一般将PH值控制在5.8左右,温度控制在18-22℃,并且每日用日光灯照射12h。 生长素/细胞分裂素 高 有利于根的分化、抑制芽的形成 低 有利于芽的分化、抑制根的形成 同常规的无性繁殖方法相比,组织培养快速繁殖法主要具有以下优点: (1)快速。 采用常规的方法如分株法,一棵花卉一年一般只能生产几株或几十株,但用组织培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数百万的小植株。 (2)周年生产。花卉组织培养快速繁殖是在实验室中进行,因条件可控,所以不受季节限制,可以全年进行连续生产。而常规的无性繁殖则受季节限制,只能在花卉生长季节进行繁殖。 (3)经济效益高。花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小,在一个200平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株。如按每株1元计算,每年产值上百万元。 (4)以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因。所以使用这项技术可让优良的品种不断地延续。 组织培养与常规繁殖相比优点众多 (一)制备MS固体培养基 (二)外植体消毒 (三)接种 (四)培养 (五)移栽 (六)栽培 二、实验操作 二、实验操作 (一)制备MS固体培养基 MS培养基包括20多种营养成分,实验室一般使用4。C保存配制
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