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- 2017-09-06 发布于重庆
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指植物的离体部分(包括任何器官、组织、细胞或原生质体),在人工控制的培养基及环境条件(温度及光照)下,得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。 二、植物组织培养的基本过程 三、影响植物组织培养的因素: 3、不同植物激素使用顺序 4、不同植物激素使用量 结果分析与评价 (一)对接种操作中污染情况的分析 (二)是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 (三)是否进行了统计、对照与记录 (四)生根苗的移栽是否合格 课题延伸(略) 练习 1.答:植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验前功尽弃,因此要进行严格的无菌操作。 2.答:外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化和再分化。 本课题内容小结 * 萧县郝集中学 菊花的组织培养 通过必修课的学习,我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么,有没有不用种子来培育植物的方法呢? 组织培养 营养繁殖 扦插 嫁接 压条 扦插 嫁接 压条 又称:植物离体培养 一、植物组织培养的概念 阅读课题背景,总结:什么是植物组织培养? 思考: 一、基础知识 1、细胞分化 (1)概念: 在生物个体发育过程中,细胞在形态、结构、功能上产生稳定性差异的过程。 (2)特点: 持久性:发生在整个生活活动过程中,胚胎期分化程度达到最大。 不可逆性: 稳定性:分化过程,遗传物质是不变的,稳定的。 (3)原因:基因选择性表达的结果 (4)结果:产生不同的组织和器官 2、植物细胞的全能性 (1)概念:高度分化的植物细胞,仍具有发育成完整植株的潜能。 (2)特点:受精卵>生殖细胞>体细胞 体细胞中:分生区细胞>成熟区细胞 高度分化的动物体细胞全能性受到限制,但体细胞核仍具有全能性。 (3)原因:体细胞都是通过有丝分裂由同一个受精卵增殖形成的,遗传物质(染色体)相同,携带有本物种的全部遗传信息。 (4)表达的条件:离体、在一定的营养物质、激素和其它外界条件(适宜的温度、PH值、光照等)才能表达。 3、植物组织培养 (1)概念:是指离体的植物器官、组织或细胞,在无菌条件下,通过脱分化和再分化形成完成植株的过程。 (2)过程: 人工种子 植株 外植体 愈伤组织 胚状体 脱分化 再分化 加上人工种皮 ①外植体:离体的植物器官、组织或细胞 ②脱分化:由高度分化的植物组织或细胞,恢复分裂增生能力,产生愈伤组织的过程 ③愈伤组织:外植体在培养过程中,通过细胞分裂所产生的、排列疏松不规则、高度液泡化的薄壁细胞群 ④再分化:愈伤组织通过细胞分裂、分化(表达全能性)形成根、芽等器官的过程 ⑤胚状体:有类似胚根、胚芽结构的新植物幼体 植物组织培养过程示意图 2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的? 没有进行灭菌处理,试管也没有做密封等。 污染的预防措施 (一)防止外植体带菌 (二)保证培养基及接种器具彻底灭菌 (三)操作人员严格遵守无菌操作规程 (四)保证接种与培养环境清洁 愈伤组织 1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等 未开花植物的茎上部新萌生的侧枝 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 阅读课文,思考以下问题 1. 同微生物培养基相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同? 2、你认为组织培养过程中,成功的关键有哪些?这些步骤的适宜条件是什么? 组织的脱分化及愈伤组织的再分化。 植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素,细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。 分化频率提高 同时使用 细胞既分裂也分化 先细胞分裂素, 后生长素 有利于细胞分裂但不分化 先生长素, 后细胞分裂素 实验结果 使用顺序 促进愈伤组织生长 比值适中 促芽分化, 抑根形成 比值低时 促根分化, 抑芽形成 比值高时 结果 生长素/细胞分裂素比值 思考:以下培养基出现的现象反应了什么问题? 生长素 / 细胞分裂素 高 利于根和愈伤组织的形成 适中 利于根芽的分化 5、pH、温度、光照(菊花
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