吉西他滨对人乳腺癌MCF-7细胞株CN-Ⅱ%2cAPE%2fRef-1+mRNA和蛋白表达的影响.pdfVIP

2 目 录 中文摘要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4 英文摘要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6 前言．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8 第一部分 不同浓度吉西他滨对人乳腺癌细胞 CN- Ⅱ、APE ／Ref-1 表达的影响 材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 10 结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 19 小结．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 25 第二部分 相对耐药浓度吉西他滨对乳腺癌细胞 CN- Ⅱ、APE ／Ref-1 表达的影响 材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 26 结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 28 小结．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 36 讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 37 结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 41 参考文献．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 42 致谢．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 45 综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 46 3 吉西他滨对人乳腺癌MCF-7细胞株CN- Ⅱ，APE ／Ref-1 mRNA和蛋白表达的影响 硕士研究生：曹永晋 导 师：石 铮 教授 中文摘要 乳腺癌的发病率在女性恶性肿瘤中居首位,并有逐年增加趋势。早期乳腺癌 经手术、放疗、化疗等综合治疗,疗效较好,晚期则失去手术机会，以化疗为主。 目前,含蒽环类及紫杉类药物的化疗方案为晚期乳腺癌治疗的首选，尽管疗效显 著,仍有20%～30%的患者发生耐药。在晚期乳腺癌的治疗中,对曾经接受过多程化 疗、特别是蒽环类及紫杉类药物耐药的患者的后续治疗是目前临床所面临的难 题。随着第三代化疗药物如吉西他滨、卡培他滨、长春瑞滨的出现，晚期乳腺癌 化疗的效果有了一定程度提高。如何提高二线药物化疗的有效率成为亟待解决问 题之一，目前研究主要集中在根据不同的患者个体特征选择最合适的治疗方案， 即个体化治疗，使得对不同患者的治疗更具针对性，从而一定程度上提高了化疗 疗效，同时也避免无效药物的使用给患者身体及经济上带来的损失。近年来随着 分子药理学和分子生物学的发展，人们对肿瘤耐药机制及由基因异常表达导致不 同个体对药物治疗反应及预后不同有了进一步的了解和认识，从而也清醒地意识 到这是进行肿瘤个体化治疗的基础和条件。 目的：研究人乳腺癌MCF-7细胞株经吉西他滨处理时CN- Ⅱ，APE/Ref-1 mRNA和蛋 白质表达的变化，并探讨二者在乳腺癌化疗耐药中所起的作用。 方法：不同浓度吉西他滨作用于人乳腺癌MCF-7细胞株24h，分别以Real-time PCR 及Western blot方法测定用药后CN- Ⅱ，APE/Ref-1的mRNA及蛋白表达情况；以相 对耐药低浓