扶正化瘀方影响TGF-β1信号转导与肾小管上皮细胞转分化的抗肾间质纤维化作用机理.pdfVIP

扶正化瘀方影响TGF-β1信号转导与肾小管上皮细胞 转分化的抗肾间质纤维化作用机理1 1 1 1 1,2 王清兰 ，袁继丽 ，陶艳艳 ，刘成海 1.上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所，上海（201203 ） 2.上海高校中医内科学E研究院，上海（201203 ） E-mail ：chenghai_liu@ 摘 要：目的：探讨扶正化瘀方影响TGF-β1信号转导与肾小管上皮细胞转分化的抗HgCl2 中 毒大鼠肾间质纤维化的作用机理。方法：SD雄性大鼠44 只, 随机分为正常组、模型组、扶 正化瘀方组（FZHY组）与维生素E组（Vit.E组），以8mg/kg HgCl2 水溶液灌胃9 周制备大 鼠肾间质纤维化模型。从造模开始扶正化瘀方组以扶正化瘀方4.6 g/kg 大鼠体重灌胃，Vit.E 组以100mg/kg大鼠体重VitE水溶液灌胃，1 次/ 天, 共9 周。免疫组化法观察肾组织α-SMA、 E-cadherin 、TGF-β1、Smad3表达，Western blot观察肾组织α-SMA 、E-cadherin 、TGF-β1、 TβR-I 、Smad2 、p-Smad2 、p-Smad3 蛋白表达。结果：与正常组相比，模型组肾组织E- cadherin表达明显降低，扶正化瘀方干预后其表达明显升高；模型组α-SMA 、TGF-β1、 TβR-I 、p-Smad2 、p-Smad3表达明显升高，扶正化瘀方干预能降低其表达。各组大鼠Smad2 表达无明显差异。结论：扶正化瘀方可抑制肾小管上皮细胞转分化从而减轻肾间质纤维 化，其机制与抑制纤维化肾脏TGF-β及其I型受体的表达、下调Smad2与Smad3的活性，抑 制TGF-β/Smads病理信号转导有关。 关键词：扶正化瘀方；肾间质纤维化；肾小管上皮细胞转分化；TGF-β1; Smads 肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis ）是由多种原因引起的细胞外基（extracellular matrix ，ECM ）在肾间质内过度沉积，同时可见肾小管变性萎缩、间质细胞增殖等，是多 种肾脏疾病发展到终末期阶段的共同途径和病理基础[1] 。肾间质纤维化与肾功能之间联系 密切，间质纤维化可导致肾小球滤过功能下降、肾功能损害或丧失。临床上，约30%-40% 的急性肾衰和20%-30% 的慢性肾衰系由小管间质疾病直接所致。因此，积极防治肾小管间 质纤维化有重要意义。 转化生长因子β1 （transforming growth factor beta-1, TGF-β1）是重要的致纤维化因子， 在肾间质纤维化的发生、发展的多个环节中起作用[2] 。在肾间质，成纤维细胞和肌纤维母 细胞是TGF-β1的主要来源，除此之外，受损的肾小管细胞及浸润于肾间质的单核细胞也可 产生TGF-β1，而TGF-β1主要通过其Smads信号通路发挥其生物学效应。肾间质纤维化的细 胞学基础是肌成纤维细胞（myofibroblast ）的活化，其肌成纤维细胞的来源具有多途径， 即除了肾脏中固有的成纤维细胞外，还有相当一部分来源于肾小管上皮细胞，通过“上皮细 胞-肌成纤维细胞转分化”(epithelial-myofibroblast transdifferentiation，EMT) 的机制[3]，肾小 管上皮细胞转变为肌成纤维细胞，合成大量ECM ，促进纤维化的发生，而TGF-β1促EMT过 [4] 程中发挥重要作用 。 我们既往实验发现由丹参、虫草菌丝等组成的抗肝纤维化中药制剂——扶正化瘀方对 肾间质纤维化有良好抑制作用[5]，本研究则基于TGF-β1信号转导及其促肾小管上皮细胞转 分化的作用，探讨扶正化瘀方抗肾间质纤维化作用机理。 1本课题得到上海市科委重点基础项目（04JC14069），教育部新世纪优秀人才资助计划（NCET-04- 0437），教育部高等学校学科博士学科点点专项科研基金（20060268005），上海高校中医内科学E-研究 院建设计划（E03008），上海市重点学科建设项目（Y0302）部分资助。